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目的:研究猕猴川西亚种下丘脑-免疫-生殖内分泌轴的组织结构,探索与其它种属的异同,为这一亚种建立形态学基础资料;观察雌激素受体α(Erα)、雌激素受体β(Erβ)、神经元型一氧化碳合酶(NOS1)三种因子在猕猴川西亚种下丘脑-免疫-生殖内分泌轴的表达,从而探讨神经-免疫-生殖内分泌系统这个“功能块”中各组织之间的功能联系。方法:运用HE染色及特殊染色研究下丘脑-免疫-生殖内分泌轴的一般结构;通过透射电镜技术观察免疫、生殖内分泌系统的超微结构;用免疫组织化学SABC法显示Erα、Erβ、NOS1在下丘脑.免疫.生殖内分泌轴中的表达。结果:
1、猕猴川西亚种下丘脑-免疫-生殖内分泌轴的显微结构
1.1下丘脑横向可以分为四个区,即视前区、视上区、结节区(又称内侧区)、后区(又称乳头区);纵向可以分为三个带,即室周带、内侧带、外侧带。各区带之间没有明显的区分,以出现特征性核团为标志。很多核团在相邻的区带之间均有投射,核团之间也没有明显的界限,其中视上核、下丘脑外侧核及结节核的界限较明显。
1.2免疫系统中胸腺、淋巴结、脾脏三种器官的基本结构与其它哺乳类类似。观察到了多种细胞成分,包括淋巴细胞、上皮细胞、肥大细胞、巨噬细胞、浆细胞、肌样细胞、树突状细胞、嗜酸性细胞等。(1)胸腺被膜较薄,皮、髓质分界比较明显;小叶种胸腺小体4-7个,有的中央已解体,有的有钙化物质沉积,有的整个解体。(2)颌下、肠系膜、腹股沟三种淋巴结被膜、副皮质区及髓质区的厚薄不等,腹股沟淋巴结被膜、髓质区及肠系膜淋巴结副皮质区相对较厚;淋巴小结大小差异较大:有的淋巴小结延伸至近髓质区,在近髓质区淋巴小结最多的是腹股沟淋巴结:副皮质区的某些部位呈球形突入髓质中。(3)脾脏被膜较厚,小梁较发达;脾窦十分丰富。
1.3内分泌系统中垂体、甲状腺和肾上腺的组织结构与其它哺乳类差异不大。(1)腺垂体远侧部中的嗜酸性、嗜碱性和嫌色三种细胞混合交错,没有明显的区域性。(2)甲状腺滤泡大小差异较大;上皮细胞趋于扁平,滤泡腔含有大量胶质,处于静止期;滤泡旁细胞较少,多数位于滤泡之间,少数存在于滤泡上皮细胞与基底膜之间。(3)肾上腺各结构之间分区明显;嗜铬细胞主要分布于近髓质的网状带和锈质区。
1.4生殖系统,(1)卵巢中可观察到各发育阶段的卵泡及大量闭锁卵泡,不易观察到成熟卵泡和排卵过程。(2)在睾丸曲精小管中不易见次级精母细胞和精子,精原细胞和精子细胞较少。
2、猕猴川西亚种免疫、生殖内分泌系统的超微结构
猕猴川西亚种免疫、生殖内分泌系统中存在一些特殊超微结构,但是总体而言与滇系猕猴和其它哺乳类差异不大。
2.1免疫系统,观察了淋巴细胞、上皮细胞、肥大细胞、巨噬细胞、浆细胞、树突状细胞、嗜酸性细胞等的超微结构。(1)肥大细胞的形态具有明显的异质性,但是其分泌颗粒主要呈类圆形或椭圆形,不如其它动物形态多样。(2)树突状细胞只有一种类型。(3)胸腺中的上皮细胞可分为6种类型;还存在一种特殊细胞,与APIJD样细胞和小淋巴细胞有相似之处。(4)淋巴结中的网状细胞存在一些特殊结构,胞核不规则有多个凹陷,细胞周围紧密围绕着大小不等的淋巴细胞,未见纤维母细胞和网状纤维相伴。(5)脾脏中存在一种特殊颗粒细胞,绕核分布有大量圆形、卵圆形或梨形的颗粒,内含致密的杆状结晶和大量细小颗粒。
2.2内分泌系统,(1)垂体中存在6种细胞,分别是生长激素细胞、促甲状腺激素细胞、催乳素细胞、促肾上腺激素细胞、促性腺激素细胞和滤泡一星形细胞。(2)甲状腺滤泡上皮细胞游离面有一些长短不一的微绒毛突入滤泡腔中;滤泡上皮细胞和滤泡旁细胞均可分为2种类型。(3)肾上腺中嗜铬细胞可分为明嗜铬细胞、暗嗜铬细胞和小颗粒嗜铬细胞三种;还存在一种胞质内含大量粗大颗粒的颗粒细胞,颗粒内有杆状结晶,与嗜酸性细胞有相似之处。
2.3生殖系统,(1)卵巢卵母细胞中观察到大量有膜包裹的均质状囊泡,在处于闭锁期的卵母细胞中更多,集中分布在细胞膜周围;卵泡膜中存在少量平滑肌。(2)睾丸中只存在一种精原细胞;曲精小管基膜外分布有一圈平滑肌纤维;间质细胞可分为3种类型。
3、 Erα、Erβ、NOS1在下丘脑-免疫-生殖内分泌轴的表达
三种因子在猕猴川西亚种下丘脑-免疫-生殖内分泌轴的分布相当广泛,同一因子在不同组织的表达、不同因子在同一组织的表达即有相似之处但也有差异。
3.1 Erα在下丘脑-免疫-生殖内分泌轴的表达
Erα主要分布在下丘脑的视前内侧核、视前外侧核、视交叉上核、视上核、下丘脑外侧核、弓状核、结节核和下丘脑后核,阳性表达较强;在下丘脑前核和室旁核阳性中等;在室周核、下丘脑背侧核和下丘脑腹侧核的反应较弱。在外周器官,Erα在胸腺、淋巴结、脾脏、垂体、甲状腺、肾上腺、卵巢和睾丸均有广泛的分布,且阳性表达均较强。
3.2 Erβ在下丘脑-免疫-生殖内分泌轴的表达
在下丘脑,Erβ主要表达在视前内侧核、视前外侧核、视交叉上核、视上核、下丘脑外侧核、下丘脑后核,其中视前内侧核、视交叉上核和视上核的表达均不如Erα;下丘脑前核、室旁核、下丘脑背侧核、结节核中无阳性反应;其它核团表达较弱。在外周器官,Erβ在胸腺、颌下淋巴结、腹股沟淋巴结、脾脏、垂体、甲状腺、卵巢和睾丸中均有表达,在表达的范围上不如Erα。
3.3 NOS1在下丘脑-免疫-生殖内分泌轴的表达
在下丘脑,NOS1的表达主要集中在视前外侧核、视交叉上核、下丘脑外侧核;在下丘脑后核阳性中等;其余核团的表达都很弱,特别是在室旁核。在外周器官,NOS1在胸腺、腹股沟淋巴结、脾脏、垂体、甲状腺、肾上腺、卵巢和睾丸中都有表达,但是它们表达的广度和阳性强度均不如Erα。