【摘 要】
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过氧亚硝酸根(ONOO-)在生物体内由一氧化氮(NO·)和超氧阴离子(O2·-)通过碰撞快速生成。ONOO-可以和二氧化碳反应生成二氧化氮自由基(NO2·)和碳酸根自由基(CO3·-)。ONOO-
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过氧亚硝酸根(ONOO-)在生物体内由一氧化氮(NO·)和超氧阴离子(O2·-)通过碰撞快速生成。ONOO-可以和二氧化碳反应生成二氧化氮自由基(NO2·)和碳酸根自由基(CO3·-)。ONOO-本身具有很强的亲核性,其共轭酸HOONO以及二级代谢产物NO2·、CO3·-具有很强的氧化性,可以和多种氨基酸、蛋白质、脂质、核酸等发生亲核加成、氧化或硝化,造成细胞凋亡或坏死。目前很多研究认为ONOO-和多种炎症、心血管疾病、神经退行性疾病以及糖尿病等有着重要的关联。荧光染料作为探针已经广泛应用于高通量筛选、实时检测、医学成像等领域。荧光染料往往具有大的平面结构,这一特点也使得它们在合成药物领域有一定的应用前景。 本论文主要分为两大部分:第一:针对ONOO-的化学性质,成功设计合成了可以用于活细胞内比率检测及成像ONOO-的探针,进行了详细的光谱学和生物成像研究。探索了可逆检测ONOO-的长波长探针以及近红外光激发的ONOO-的供体的研究。第二:设计合成了一系列基于硅-罗丹明染料9位修饰化合物,并研究了他们在人体和植物体抗菌方面的活性。 1.基于菁染料Cy3和Cy5设计合成了具有荧光共振能量转移(FRET)性质的探针PNCy3Cy5,与现有的ONOO-探针相比,具有以下优点:a)是首个报道的针对ONOO-的小分子FRET探针,可以实现单一波长激发下,比率型检测ONOO-;b)具有很好的透膜性,特异性地定位于线粒体(ONOO-在生物体内的主要生成位点),首次实现了对线粒体中ONOO-的比率成像。(论文第三、四章) 2.以EC染料为母体,基于富电子苯环易被氧化的机理设计了可逆检测ONOO-的长波长荧光探针ECJ,其合成还在进行中。(论文第五章) 3.以近红外发射的硅-罗丹明染料为母体,基于本课题组之前开发的光控释放NO的方法,以富电子苯环为受体设计了近红外光激发的ONOO-供体PNDSi,但合成过程中并未得到稳定的供体,因此将进一步探索其他合成方法或更换荧光团来实现近红外光控释放ONOO-。(论文第六章) 4.以硅-罗丹明染料为母体,9位引入一系列伯胺基团,设计合成了10个化合物SiNH-a~j,并测试了它们的抗菌活性。筛选得到3个化合物对革兰氏阳性菌和阴性菌(离体)均有良好活性。另外筛选出1个化合物对黄瓜霜霉病(活体)有较优活性,1个化合物对黄瓜炭疽病(活体)有良好活性,3个化合物对稻瘟病(离体)有良好活性。它们的具体抗性机理及药效关系还在进一步研究中(论文第七章)。
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