花器浸蘸农杆菌转化小麦的探索

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该实验室通过针刺注射农杆菌于小麦和玉米茎基部方法已经初步了解到vir基因在侵染部位被诱导表达水平较低可能是小麦和玉米轮困难的重要原因之一.农杆菌介导拟南芥转化的花器浸蘸法是当前不需要组织培养或植株再生的最简单转化方法,但是这种方法一直还没有成功地用来转化其它作物.为了将该方法用于小麦的转化,该论文研究了农杆菌在小麦花器中生存、vir基因表达、T-DNA转移到植物细胞核及T-DNA能否整合到小麦基因组等情况,初步探讨了花器浸蘸法是否可以应用到由农杆菌介导的小麦转化.将组成型启动子控制的gfp标记的菌株CG-19、gfp与vir基因融合的菌株CG-8(virH2-gfp)和CG-14(virB4-gfp)在小麦不同的花期、不同的接种条件下浸蘸小麦花器,利用共聚集激光扫描显微镜检测GFP的荧光强度以及荧光细胞群体数量系统地研究了农杆菌在花组织中的生存状况和vir基因表达良好的最佳条件.
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