论文部分内容阅读
目的:研究三黄汤，黄连解毒汤和五味消毒饮三种中药汤剂对ESBLs阳性E.coli部分或全部恢复对抗生素敏感性的作用，测定三种方剂产生最佳逆转效果的浓度，并提取ESBLs检测其活性及含量，研究可能的逆转机制。通过统计分析，从三种方剂中选择逆转效率最佳的组方以及浓度。选取同样的干预条件，对受试ESBLs阳性E.coli进行培养，提取菌体内总RNA进行RT-PCR，通过琼脂糖凝胶电泳分析目的基因表达量的变化，并判断该组方对受试E.coli内ESBLs编码基因的影响。
方法：应用纸片扩散法和双纸片协同法筛选ESBLs阳性E.coli，用试管二倍稀释法确定三种中药方剂的MIC(最低抑菌浓度)，选取低于MIC的不同浓度在规定时间下培养耐药E.coli，比较各中药不同浓度的逆转效果。提取ESBLs并测定酶活性和含量，分析比较进而探讨其逆转机理。经统计分析后，得到最佳的药物及逆转浓度，培养ESBLs阳性E.coli18-24小时，使用RNA提取试剂盒获得RNA样本，进行RT-PCR后通过琼脂糖凝胶电泳及相关软件分析目的基因的表达量变化，从而判断所选组方对ESBLs阳性E.coli内ESBLs编码基因的干预作用。
结论：中药能够通过抑制ESBLs阳性E.coli内ESBLs的活性和表达量降低细菌耐药性，且其逆转作用与中药浓度有关，0.2g/ml三黄汤对ESBLs阳性E.coli体内的ESBLs编码基因OXA有抑制作用，可以使其表达量下降。中药方剂对受试菌TEM，CTX-M，SHV,Acr-AB基因尚未发现确切干预作用