轮状病毒(Rotavirus,RV)属呼肠病毒科(Reoviridae)轮状病毒属,是引起人类、哺乳动物类和鸟类腹泻的主要病原体。完整的RV病毒分为三层结构,VP6蛋白位于病毒的内壳中间层,为第6基因片段编码,由397个氨基酸组成,分子量约为44.8KDa。VP6蛋白是轮状病毒中含量仍然最丰富的蛋白,约占病毒总蛋白量的51%,轮状病毒内壳由VP6蛋白构成的260个致密的三聚体所形成。VP6在病毒结构中具有物理受体的作用,在病毒基因转录中也具有重要作用。本研究中的VP6基因克隆自临床样品中分离的A组轮状病毒TB-Chen株。研究中,以VP6全基因为模板,经PCR扩增,基因重组,将VP6蛋白编码基因插入到质粒pET中构建了原核表达质粒pET-VP6,并在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达重组VP6蛋白(rVP6)。rVP6占菌体总蛋白的27.4%。rVP6经纯化后免疫兔,获得动物免疫血清抗体。Western blot检测结果显示,表达的rVP6能被抗-rVP6兔血清抗体特异性识别,能被抗-SA11和抗-Wa的兔免疫血清抗体特异性识别。免疫荧光结果显示MA104细胞中的RVVP6抗原在RV感染3h后即可观察到,在12h左右荧光强度达到最高。病毒的VP6蛋白大部份散布于细胞质间,主要以颗粒状的形式分布。中和实验结果显示,抗-rVP6的兔血清抗体具有中和RV SA11和Wa株病毒的中和病毒感染活性。这些结果为明确A组轮状病毒VP6的生物学和免疫学特性及其在RV亚单位疫苗应用开发中的价值提供了理论实验基础。