【摘 要】
:
pp24蛋白是马立克氏病病毒(Marek’s Disease Virus,MDV)的一个特异性蛋白,由pp24基因编码。该蛋白在天然状况下可能与MDV的另一个特异性蛋白-pp38以异二聚体的形式结合在一起,
论文部分内容阅读
pp24蛋白是马立克氏病病毒(Marek’s Disease Virus,MDV)的一个特异性蛋白,由pp24基因编码。该蛋白在天然状况下可能与MDV的另一个特异性蛋白-pp38以异二聚体的形式结合在一起,共同在MDV的致肿瘤中发挥作用。 根据马立克氏病病毒国际参考强毒GA株pp24基因序列,设计和合成了一对引物,其两端分别含Sal Ⅰ和EcoR Ⅰ的酶切位点。以CVI988株基因组DNA为模板,通过PCR技术,扩增其pp24基因阅读框(ORF)。PCR产物在1.2%的琼脂糖凝胶上电泳表明,所获得的PCR产物的分子量大小约为467bp,该DNA条带大小与理论设计的核酸片段大小相符。PCR产物经纯化、酶切后,按正确的阅读框架定向克隆到表达性载体pGEX-6P-1中谷胱甘肽转移酶(GST)基因的下游。将重组质粒转化进大肠杆菌BL21中,在1.0mM IPTG和37℃条件下诱导,GST-pp24基因获得了表达。诱导菌体的裂解物经12%的SDS聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western-blot试验验证,得到大小为43KD的融合蛋白,与预期大小一致。 将表达产物从SDS-PAGE凝胶中切出回收,蛋白条带冻干并碾成粉末,粉末与PBS适量混合后,腹腔注射8周龄健康ICR小鼠,20μg/只,每周免疫一次,第五次免疫后10天眼球采血,析出血清,所得的抗血清与MDV 814株和RB1B株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)进行间接免疫荧光试验(IFA),结果呈阳性反应。表明大肠杆菌中表达的pp24融合蛋白保留有特异的抗原性。 本研究制备的MDV pp24融合蛋白,为进一步制备抗pp24蛋白的单克隆抗体提供了前提条件。为进一步研究pp24基因的生物学活性提供了一些可借鉴的方法。
其他文献
高校思想政治理论教育教学改革的重要目标,在于提升教学的质量、增强课堂吸引力感染力、更加有效的将知识践行于实际.教学的内容、目标、方式是实现教育教学改革的三个中心点
绵羊肺腺瘤病是绵羊的一种传染性肺脏肿瘤病,由反转录病毒引起。本试验以某羊场病死羊肺脏作为病料,制成病理组织切片,通过病理组织学检查,结果表明:肺脏主要病变是肺泡细胞变为立
新形势党员干部党性修养和作风建设状况,直接影响党的形象和党的事业,需要引起高度重视,认真加以解决.rn1 当前党员干部党性修养存在的突出问题rn当前党员干部党性修养和作风
理论联系实际,既是马克思主义的一条重要原则,也是学习马克思主义理论必须坚持的优良学风和根本方法.在依法治国的总目标,构建社会主义和谐社会的大格局下,只有坚持这一原则,
文章首先对培智中学开展心理健康教育的意义进行深层次分析,并介绍了在培智学校教育中渗透心理健康教育所需要的基础条件.其次重点探讨心理健康教育在培智学校教学中渗透的措
随着政党的产生与发展,党风廉政建设逐渐发展成为了各党谋求发展与巩固地位的一个重要准则.高校是向社会输出人才的聚集地,也是人才培养和成长的发源地,这不仅要注重各级高校
原发性肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,具有起病隐匿、病程短,进展快、恶性程度高、疗效差、患者生存期短等特点,严重危害人们的身心健康。多年来我国医务工作者在应用中医药治
糜蛋白酶,是从牛或者猪的胰脏内提取的一种蛋白水解酶,主要贮存在肥大细胞分泌颗粒中,也是肾素-血管紧张素系统的活性成员之一,它具有肽链内切酶的作用,在体内发挥许多重要作用。
狗舌草60%乙醇提取物具有抑制L_(1210)细胞的作用,其中主要含有生物碱和黄酮类化合物。为了更好地评价狗舌草的药理活性和毒性并筛选出狗舌草的有效成分,本研究对狗舌草生物碱成分进行了分析,对其总碱的LD_(50)进行了测定,并用分离得到的一个单体生物碱进行了抗肿瘤试验。 1.狗舌草总生物碱的提取与氮氧化物的检测 利用冷浸法和热回流法从狗舌草粉中提取出浸膏,浸膏用1%HCl酸化,过滤,得酸
一个群体、一个团队、一个班级的发展和管理脱离不了凝聚力的核心作用.增强班级凝聚力,对强化班级管理、提高全体学生的团队意识和集体荣誉感有十分重要的意义.本文阐述了班