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马尾松花粉是天然花粉，含有蛋白质、氨基酸、糖类、维生素及微量元素等，具有抗肿瘤、抗衰老、增强免疫等功效。本文以马尾松花粉多糖为原料，对马尾松花粉多糖的分离纯化、理化性质、化学修饰、结构分析、生物活性等方面进行系统研究，得到如下结论: 1.马尾松花粉多糖的分离纯化研究 60％乙醇浸提得到的马尾松花粉多糖(PPM60)经 Sephacryl S-400HR层析最后得到四个组分:PPM60-A、PPM60-B、PPM60-C、PPM60-D。用不同分子量的葡聚糖作标准品，测得四个组分的分子量大小分别为:1.4×106、1.2×106、8.6×104、5.7×104。 2.马尾松花粉多糖的硫酸酯化修饰 采用氯磺酸-吡啶法对马尾松花粉多糖及分离出的四个组分进行硫酸酯化改性，得到硫酸酯化多糖:SPPM60、SPPM60-A、SPPM60-B、SPPM60-C、SPPM60-D。用氯化钡-明胶比浊法鉴定硫酸根含量，取代度分别为1.44、1.40、1.32、1.57、1.47。 3.马尾松花粉多糖硫酸酯化前后的单糖组成 马尾松花粉多糖各分离组分及其酯化物经 HPLC分析其单糖组成发现：PPM60-A主要由甘露糖，未知单糖，半乳糖，岩藻糖组成，其摩尔比为5.76:2.73:3.35:1；SPPM60-A主要由甘露糖，未知单糖，半乳糖，岩藻糖组成，其摩尔比为6.38:3.91:5。21:1；PPM60-B主要由甘露糖，未知单糖，半乳糖，岩藻糖组成，其摩尔比为1.45:0.82:1.54:1；SPPM60-B主要由甘露糖，未知单糖，半乳糖，岩藻糖组成，其摩尔比为2.37:0.68:0.75:1；PPM60-C主要由甘露糖，未知单糖，半乳糖，岩藻糖组成，其摩尔比为9.50:3.55:4.76:1；SPPM60-C主要由甘露糖，未知单糖，半乳糖，岩藻糖组成，其摩尔比为2.85:0.98:1.11:1；PPM60-D主要由甘露糖，葡萄糖，未知单糖，半乳糖组成，其摩尔比为1.95:0.66:0.41:1；SPPM60-D主要由甘露糖，葡萄糖，未知单糖，半乳糖组成，其摩尔比为2.31:0.55:0.55:1。 4.马尾松花粉多糖及其酯化物对大鼠心肌细胞 H9C2(2-1)内游离钙离子浓度的影响 采用Fura2-AM荧光法测定大鼠心肌细胞 H9C2(2-1)内游离钙离子浓度。PPM60，PPM60-A，PPM60-B，PPM60-C，PPM60-D及SPPM60，SPPM60-A，SPPM60-B，SPPM60-C，SPPM60-D都可以显著提高大鼠心肌细胞 H9C2(2-1)内游离钙离子浓度，并且马尾松花粉多糖经硫酸酯化后，对大鼠心肌细胞 H9C2(2-1)内游离钙离子浓度的提高作用有所增强。而 PPM60-A在酯化前后对H9C2(2-1)内游离[Ca2+]i影响的差别最为明显。 5.马尾松花粉多糖的结构解析 选择 PPM60-A和SPPM60-A进行结构解析，对PPM60-A和SPPM60-A的紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)、核磁共振(1HNMR、13CNMR)、原子力显微镜(AFM)分析，得到如下结论: 紫外光谱扫描结果显示 PPM60-A和SPPM60-A在260 mn和280 nm两处均无明显吸收，说明纯化后的PPM60-A和SPPM60-A已不含核酸和蛋白质。 红外光谱表明 PPM60-A是不含糖醛酸的中性糖，组成单糖为吡喃糖，同时用红外光谱法确定了SPPM60硫酸酯键的特征吸收峰，表明多糖已经硫酸酯化。 1H-NMR显示 PPM60-A和SPPM60-A既含有α-糖苷键，又含有β-糖苷键。并且具有岩藻糖甲基的特征吸收峰。通过13C-NMR我们可以看出 PPM60-A和SPPM60-A具有4个单糖残基组成重复单元，组成单糖为吡喃糖。 采用原子力显微镜对PPM60-A和SPPM60-A的高级结构进行观察，发现 PPM60-A集聚成均匀的小圆球颗粒，直径约为20-40 nm，高度1-3 nm；SPPM60-A具有火焰状突起，直径约为20-70 nm，高度约为5-8 nm。 高碘酸氧化和Smith降解结果表明PPM60-A主链中含有1→6键型和1→2键型，SPPM60-A主链中主要含有1→6键型。