第一部分：人髂骨生长板软骨细胞的体外培养及鉴定　　 目的：建立人髂骨生长板软骨细胞体外培养的可行性并观察其生物学特征，为后续分子生物学检测做准备。　　 方法：对手术中获得的10例青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis，AIS)患者髂骨生长板软骨行体外分离、培养，观察细胞形态，MTT法测定细胞增殖，Ⅱ型胶原免疫组化染色，采用逆转录聚合酶链反应检测各代细胞Ⅱ型胶原mRNA的表达水平。　　 结果：(1)体外培养的软骨细胞随着传代次数的增加，细胞形态由原代的多角形逐渐变为长梭形；(2)MTT比色法检测显示，第2代髂软骨细胞的生长曲线近似倒“S”形，在第4～8d细胞呈对数生长，在9～10d达平台期，至第11d开始出现生长抑制。(3)第2代细胞Ⅱ型胶原免疫组化呈强阳性。(4)Ⅱ型胶原mRNA表达水平从第2代后随着传代次数的增加逐渐下降。　　 结论：采用联合酶序贯消化法将软骨细胞悬液和软骨块共同体外培养髂软骨细胞简单、有效，P2代细胞很好的保持了软骨细胞的特性，可以作为种子细胞来源　　 第二部分：青少年特发性脊柱侧凸患者软骨细胞中SOX9的表达及意义　　 目的：检测转录因子SOX9在AIS患者软骨细胞中的表达，探寻其在AIS患者生长发育异常中的可能作用。　　 方法：本实验分为两组：AIS组，14例(男1例，女13例)，年龄10～16岁，平均13.1岁，Cobb角41°～88°，平均51.4°；同年龄对照组，8例(男1例，女7例)，年龄10～15，平均12.9岁。在行手术治疗时获取髂骨生长板软骨，采用酶消化法体外分离、培养、传代，并观察细胞形态；采用Ⅱ型胶原细胞免疫组织化学法对传至P2代的细胞行表型鉴定；采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western blotting)检测两组软骨细胞中SOX9 mRNA及蛋白表达情况。　　 结果：酶消化法体外单层培养软骨细胞简单，可行；细胞传至P2时具有软骨细胞的典型形态特征，呈多角状；Ⅱ型胶原细胞免疫组化呈阳性，细胞胞浆内可见棕褐色颗粒，很好的保持了软骨细胞的表型特征；AIS组软骨细胞中SOX9核酸表达强度为1.08±0.14，蛋白水平的表达表达强度为0.38±0.14，均较同年龄正常对照组高(P<0.05)。　　 结论：转录因子SOX9在软骨细胞水平表达强度的异常可能与AIS患者生长发育异常有关。