黄曲霉毒素B1(AflatoxinB1，AFB1)是黄曲霉毒素中毒性最强的一种毒素，国际上以黄曲霉毒素的毒性作为10，000的基准，来比较其它物质的毒性。黄曲霉毒素的危害性主要表现为强烈的毒性和致癌性，由于它在花生、玉米等食品中广泛存在，因此严重危害了人们的身体健康。在现代社会里，随着人们生活水平的提高，人们日益关注食品安全问题。食品安全已引起各国政府的严重关注，欧盟在2000年就提出了世界上最严格的安全标准和检验标准，其中AFB1为2μg/kg，总黄曲霉毒素为4μg/kg。因此，也形成了新贸易壁垒，对我们国家的农产品出口造成了重大的经济损失。 本试验从AFB1-BSA免疫小白鼠开始，先使用间接ELISA评价免疫后抗血清的效价，然后选择抗血清最高效价达到了64，000的小鼠，提取小鼠的脾脏的总RNA，根据他们对应的引物，通过RT-PCR分别扩增出对应的重链VH、轻链VL和连接多肽Linker的基因，然后通过引物设计成重叠延伸拼接(splicingbyoverlapextension，SOE)PCR方法扩增出单链抗体scFv基因。把scFv基因与Pharmcia公司提供的质粒载体pCANTAB-5E连接起来，通过电转化到大肠杆菌TG1中，就构建了库容量达到了108单链抗体抗体库。 单链抗体抗体库培养到对数期后，通过辅助噬菌体M13KO7进行超感染后，单链抗体就展示噬菌体衣壳蛋白的N端，从而得到噬菌体抗体库。这样的噬菌体抗体库可以通过三轮“淘洗—富集—扩增”以后，通过ELISA检测从而获得针对AFB1-BSA具有特异性抗性的抗体。再把这种噬菌体抗体库的上清感染HB2151，使得单链抗体在大肠杆菌中获得可溶性表达后，通过ELISA检测分泌到菌液和细胞周质腔中的单链抗体蛋白的相对活性。我们试验的结果是获得了三可以分泌特异性抗体的菌株，它们分别是3C3、3B3和4A2。 由于单链抗体主要在疾病治疗中应用更为广泛一点，由于它本身的遗传稳定性并不好，因此，单链抗体很少直接应用检测。因此在试验最后，我们直接购买江苏微生物所的抗黄曲霉毒素B1的单克隆抗体试剂盒，检测了来自市场上四花生样品中AFB1的含量，试验的结果让人遗憾。从国家安全标准来说，我国规定玉米、花生、花生油等食品中黄曲霉毒素含量不超过20μg/kg；只有编号为C-好的花生样品中AFB1含量偏低，其他的三样品均超过了国家食品安全标准。不过，鉴于取样的随机性和样品的数目偏少的缘故，我们的试验结果没有太大的说服力，只能说这样的商品存在着潜在的风险。