Trametes sp.AH28-2漆酶研究

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漆酶是一类含铜的多酚氧化酶,它能催化一系列有机和无机化合物,包括单酚、二酚和多酚、胺基酚、甲氧基酚类和金属离子复合物等发生一个电子氧化,同时伴随有分子氧还原成水.它与植物抗坏血酸氧化酶、动物血浆铜蓝蛋白同属于铜蓝氧化酶家族,产生于植物、昆虫和微生物,特别是真菌.在植物,漆酶参与木素合成和细胞壁构建;在真菌,漆酶涉及子实体发育、菌索形成、孢子色素产生和真菌致病性等.由于具有宽泛的底物专一性,漆酶在制浆造纸废水处理、有毒环境污染物转化和能源开发等诸多领域具有重要潜在应用价值,成为近年来倍受关注的环保用酶.研究了游离的漆酶A对2,6-二氯酚、2,4,6-三氯酚和芴三种化合物的氧化作用.实验表明,2.0u的漆酶A能在6h内完全氧化100μmol/L2,6-二氯酚、2,4,6-三氯酚,但酶对2,4,6-三氯酚的氧化速率稍快于2,6-二氯酚.在1 mmol/L ABTS和1-羟基苯并三唑(HBT)存在的条件下,15.0u的漆酶A在18h内能氧化70﹪的芴.当反应混合物中缺乏ABTS和HBT时,未检测到芴含量有明显减少.以壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂进行了漆酶A的固定化研究.确定的酶固定化适宜条件为:0.1g壳聚糖与15mL5﹪戊二醛交联8h后,加入30.0u酶固定12h.在此条件下获得的固定化漆酶催化能力为176.4 u/g载体,酶活回收率58.5﹪.与游离酶相比,固定化漆酶与愈创木酚的亲和力降低,但固定化酶的稳定性有明显改善.
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