【摘 要】
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利用ES细胞便于进行神经细胞发育和分化研究.若对干细胞进行适当诱导,得到特定类型的神经细胞,对损伤与病变的细胞予以补充,将使干细胞成为今后细胞替代疗法和组织器官移植的
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利用ES细胞便于进行神经细胞发育和分化研究.若对干细胞进行适当诱导,得到特定类型的神经细胞,对损伤与病变的细胞予以补充,将使干细胞成为今后细胞替代疗法和组织器官移植的有效来源.因而诱导干细胞分化为神经细胞,不论在理论研究还是在临床应用上都已成为研究热点.维甲酸(retinoic acid,RA)作为一种非特异性诱导剂被广泛用于ES细胞诱导研究中,但由RA诱导的细胞,其中含有许多不同种细胞,这使得每步分化难以分析和控制.因而,利用ES细胞定向诱导分化方法产生单一类型的分化细胞具有重要的意义.该研究的目的在于尝试以RA联合小脑神经细胞上清液诱导ES细胞向小脑神经细胞分化,以期能为细胞移植替代治疗小脑神经变型性疾病提供细胞来源.实验结果如下:1选择合适的培养基能在5天扩增12倍以上.扩增后的ES细胞较好的保持了胚胎干细胞的全能性和二倍体核型.2光镜下观察RA诱导组与RA联合小脑神经细胞上清液诱导组随诱导时间的分化状态,结果表明RA联合小脑神经细胞上清液诱导组细胞有大量的单一小脑神经元样细胞出现,且MAP-2阳性细胞多为神经元样;而RA诱导组细胞成多种形态分布,MAP-2阳性细胞多为胶质细胞样.3RT-PCR检测两诱导组细胞钠通道α亚型(SCN1A,SCN2A,SCN3A,SCN8A)的表达,RA联合小脑神经细胞上清液诱导组细胞较单独使用RA诱导组更似小脑神经细胞内钠通道亚型的表达.结论:该文所尝试的RA联合小鼠小脑神经细胞上清液能有效地诱导胚胎干细胞向小脑样神经元细胞分化.
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