【摘 要】
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目的：检测HIF-1α沉默后卵巢癌SKOV3细胞中LRP蛋白的表达情况，从而探讨LRP蛋白的表达受HIF-1α的影响情况。 方法：1.构建特异性HIF-1α-shRNA重组质粒。2.培养养卵巢癌SKOV3
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目的：检测HIF-1α沉默后卵巢癌SKOV3细胞中LRP蛋白的表达情况，从而探讨LRP蛋白的表达受HIF-1α的影响情况。 方法：1.构建特异性HIF-1α-shRNA重组质粒。2.培养养卵巢癌SKOV3细胞。3.用脂质体法将构建特异性HIF-1α-shRNA重组质粒转染卵巢癌SKOV3细胞，以转染无关序列(空白)质粒shNC为阴性对照，观察转染效率。4.采用Westernbot法检测HIF-1α沉默后卵巢癌SKOV3细胞中LRP蛋白的表达情况。 结果：1.成功将体外构建的特异性HIF-1α-shRNA重组质粒转染入卵巢癌SKOV3细胞，在荧光显微镜下观察转染效果，其转染效率达70％以上。2.Westernblot检测结果显示：与空白对照组及阴性对照组相比，实验转染组HIF-1α蛋白表达量大大减少(P<0.05)，LRP蛋白表量也显著减少(P<0.05)；而空白对照组与阴性对照组相比HIF-1α蛋白和LRP蛋白表达量均无显著差异(P>0.05)。 结论：靶向HIF-1α基因的RNA干扰载体成功转染至卵巢癌SKOV3细胞，有效抑制了细胞HIF-1αmRNA基因的表达；HIF-1α基因沉默后LRP蛋白表达量减少。
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