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研究背景和目的：本研究利用慢病毒载体与COX-2基因连接，构建稳定表达COX-2的人肠癌细胞株，然后将细胞株植入到裸鼠体内，让其稳定的表达COX-2，实现慢病毒载体和COX-2基因平行表达，通过这种方法建立了大肠癌裸鼠肿瘤模型，用于对大肠癌侵袭转移及其作用靶点的的研究，同时为抗肿瘤药物筛选提供新的实验动物模型。作者在研究中发现，去甲斑蝥素能够抑制COX-2启动子荧光素酶报告基因的转录水平，同时对大肠癌细胞有显著的增殖抑制作用。因此，本研究在前期研究的基础上建立COX-2高表达裸鼠人肠癌模型，研究COX-2对肠癌侵袭转移的调节机制。并在此基础上探讨去甲斑蝥素对其影响，为中药防治肠癌的复发转移提供实验依据。 方法： 1.构建COX-2基因过表达慢病毒载体及筛选稳定过表达COX-2肠癌细胞株HCT116/COX-2，采用改进亚甲基蓝法、细胞黏附实验、Transwell小室法检测COX-2对肠癌细胞增殖、黏附及侵袭转移能力的影响。 2.COX-2高表达裸鼠人肠癌模型的建立及活体成像评价：分别建立皮下异位移植瘤模型，以及肠原位动物模型，以正常HCT116细胞和HCT116-空质粒组做对照，研究COX-2对大肠癌生长、侵袭迁移及动物生存期的影响。 3.采用双荧光素酶COX-2启动子报告基因筛选以COX-2为靶点的中药活性成分，分别采用亚甲基蓝法进一步验证去甲斑蝥素对肠癌细胞HCT116/COX-2的生长抑制作用。 4.用细胞划痕实验、细胞黏附实验、Transwell小室法、WestrnBlot检测去甲斑蝥素对HCT116/COX-2肠癌细胞增殖、黏附及侵袭转移能力以及对COX-2蛋白表达的影响。 5.分别建立HCT116/COX-2皮下异位移植入结肠癌裸鼠模型，以及结肠原位接种自发转移动物模型，评价COX-2基因对HCT116细胞成瘤、肿瘤生长速度及侵袭转移的影响，并观察去甲斑蝥素对裸鼠人大肠癌的生长、侵袭迁移、及动物生存期的影响。 结果： 1.成功构建COX-2基因过表达慢病毒载体，并成功用单克隆法筛选出稳定高表达COX-2的肠癌细胞株HCT116/COX-2。 2.在体外实验中COX-2基因能显著促进大肠癌细胞系HCT116的增殖，黏附力，以及侵袭转移。黏附实验结果表明：HCT116/COX-2组大肠癌细胞黏附能力明显高于对照组，且具有统计学意义(p<0.05)；运动及侵袭实验结果证实：与对照组相比，HCT116/COX-2组大肠癌细胞穿膜细胞数明显增加(p<0.01) 3.成功建立COX-2基因过表达的裸鼠人肠癌原位和皮下移植瘤模型，COX-2过表达组肿瘤生长率，肝转移率及腹水发生率明显高于对照组(p<0.05)。 4.去甲斑蝥素能抑制体外培养的人HCT116/COX-2肠癌细胞增殖、黏附及侵袭转移能力，抑制裸鼠人肠癌移植瘤生长，并且呈现剂量依赖性。并对COX-2启动子转录活性、COX-2蛋白表达均有明显的抑制作用(p<0.01)。 结论： COX-2能显著促进大肠癌的增殖、黏附和侵袭转移；成功建立了COX-2过表达肠癌动物模型，该动物模型为大肠癌侵袭转移的基础研究和抗大肠癌药物筛选提供新的研究工具。 传统中药斑蝥提取物去甲斑蝥素对人HCT116肠癌细胞增殖、黏附及侵袭转移能力有明显的抑制作用，并能延长人肠癌裸鼠的生存期。去甲斑蝥素抗大肠癌的机制与其下调COX-2启动子转录活性，抑制COX-2基因表达有关。