过氧化物酶(Peroxidase,POD,EC1.11.1.7)是抗氧化酶中的重要成员之一,在植物体中发挥了重要作用,与植物的生长、发育、逆境耐受、防御过程有关,直接参与了细胞壁的木质化和角质化、细胞衰老、生长素代谢、受伤组织的栓化愈合和对病原的防御反应。其中,在清除ROS(reactive oxygen species)方面过氧化物酶作用较大。　　 近年来盐芥(Thellungiella halophila)作为盐生模式植物,研究其抗盐机理备受关注。本实验室已经克隆了盐芥2个具有重要作用的编码POD的基因:ThPER32和ThPER42,并在NCBI上注册,注册号分别为EF195127和EF580925。本研究通过构建真核表达载体和转基因研究旨在进一步探讨其功能。结果如下:　　 1.选取表达载体pPZP212,成功构建了组成型表达启动子CaMV35S控制下的盐芥过氧化物酶基因ThPER32与ThPER42的植物表达载体pPZP212-ThPER32和pPZP212-ThPER42,并转化根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105。　　 2.分别采用蘸花法和叶盘法通过农杆菌介导将ThPER32与ThPER42转入拟南芥(Arabidopsis thaliana)和烟草(Nicotianatabacum)中。对转化的拟南芥和烟草进行了标记基因的抗性筛选。在基因组DNA水平和转录水平上鉴定并获得了转ThPER32与ThPER42烟草。　　 3.为研究ThPER32和ThPER42在烟草中的过表达与抗逆性关系,采用NaCl(浓度为150mmol·L-1、300mmol·L-1)处理野生型烟草和转ThPER32烟草,观察表型;分别采用NaCl(浓度为O、150、300mmol·L-1)和PEG6000[浓度为0％、5％、15％(W/V)]处理野生型烟草和转ThPER42烟草,并测定了两者的过氧化物酶活性和叶绿素荧光参数。　　 分析表明转ThPER32烟草比野生型烟草具有较强的耐盐性,转ThPER42的烟草比野生型烟草具有较强的耐盐和耐旱能力,初步说明ThPER32和ThPER42在烟草中的过表达提高了烟草的抗逆性。