Ang-2、VEGF在子宫内膜异位症中的表达及相关性研究

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目的:检测促血管生成素-2(Angiopoietin-2,Ang-2)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在子宫内膜异位症患者(EMs)在位内膜、异位内膜及腹腔液中的表达水平,并探讨两者在EMs中的相关性,进一步了解EMs的发病机制,为其诊断和治疗提供理论依据。方法:1研究对象:1.1实验组:随机选取我院2006年12月至2007年10月住院行腹腔镜或开腹手术及病理检查确诊的内异症患者为研究组,其中分为内膜组和腹腔液组。内膜组患者30例(增生期16例、分泌期14例),患者的中位数年龄36.2岁(21-45岁)。此组又分两个小组:子宫内膜异位症的在位内膜组、子宫内膜异位症的异位内膜组。腹腔液组患者27例(增生期17例、分泌期10例),患者的中位数年龄25.2岁(21-36岁)。1.2对照组:随机选取我院同期因不孕行腹腔镜检查同时刮宫送病理的患者(刮取的子宫内膜均由病理证实为正常的子宫内膜)为对照组,其中分为内膜组和腹腔液组。内膜组患者30例(增生期15例、分泌期15例),患者的中位数年龄30.1岁(26-36岁)。腹腔液组患者15例(增生期10例、分泌期5例),患者的中位数年龄30.3岁(26-36岁)。两组人群月经周期的划分根据末次月经及子宫内膜病理结果证实,且月经周期正常;近半年无阴道不规则出血史;术前6个月均未口服避孕药及安装宫内节育器;术前6个月内未进行相关治疗;患者本身无高血压、心脏病、糖尿病、肾病等内科疾病,无急慢性盆腔炎史及其它病史。2标本采集2.1腹腔液采集腹腔镜检查明确后,在子宫直肠陷凹处吸取约3ml腹腔液(血染者弃之) ,置于无菌离心试管中,常温下以3000r/ min离心10min后吸取上清液,做好标记,储存于- 70℃低温冰箱中备用。2.2内膜标本采集腹腔镜检查明确后,在收集腹腔液后用小号刮匙刮取子宫内膜并取异位内膜组织,子宫内膜标本均用生理盐水反复冲洗,10 %多聚甲醛固定。3实验方法:采用免疫组化的方法对Ang-2、VEGF在实验组的在位内膜、异位内膜和对照组中的表达进行测定。采用ELISA的方法对Ang-2在实验组和对照组的腹腔液中的表达进行测定。对所得结果进行SPSS13.0统计学处理。结果:1 Ang-2定位于腺上皮细胞、间质细胞和血管内皮细胞,主要表达于细胞质。VEGF在子宫内膜主要分布于腺上皮细胞、间质细胞及部分血管内皮细胞的胞浆,可在整个月经周期中检测到。2 Ang-2在正常内膜组、在位内膜组、异位内膜组的阳性表达率分别为16.67%、66.67%、40.0%。其在三组中的表达进行两两比较,结果均有统计学意义,分别为a.实验组的在位内膜组与对照组相比Ang-2的表达水平显著升高,且两者之间有显著性差异(χ~2=15.429,P<0.05);b.实验组的异位内膜组与对照组相比Ang-2的表达水平显著升高,且两者之间有显著性差异(χ~2= 4.286,P<0.05);c.实验组的在位内膜组与异位内膜组相比Ang-2的表达水平显著升高,且两者之间有显著性差异(χ~2=4.022,P<0.05) ;d. Ang-2在对照组周期性表达,增殖期的阳性表达强度显著高于分泌期(33.33%、0% ),差异有显著意义(χ~2=6.0, P<0.05);e. Ang-2在在位内膜持续性表达,增殖期的阳性表达强度与分泌期相似(62.5%、71.4%),差异无显著意义(χ~2=0.268,P>0.05)。3 VEGF在正常内膜组、在位内膜组、异位内膜组的阳性表达率分别为30.0%、93.33%、73.30%。其在三组中的表达进行两两比较,结果均有显著性差异,分别为a.实验组的在位内膜组与对照组相比VEGF的表达水平显著升高,且两者之间有显著性差异(χ~2=25.452,P<0.05);b.实验组的异位内膜组与对照组相比VEGF的表达水平显著升高,且两者之间有显著性差异(χ~2=11.279 ,P<0.05);c.实验组的在位内膜组与异位内膜组相比VEGF的表达水平显著升高,且两者之间有显著性差异(χ~2=4.320,P<0.05);d.VEGF在对照组持续性表达,增殖期的阳性表达强度显著高于分泌期(53.33%、6.7%)差异有显著意义(χ~2=7.778, P<0.05);e. VEGF在位内膜组织的增殖期的阳性表达强度与分泌期相似(93.75%、92.86%) ,差异无显著意义(χ~2 =0.01,P > 0.05)。4在实验组的在位内膜组中Ang-2、VEGF的表达存在相关性(P<0.05 r= 0.725 );在实验组的异位内膜组中Ang-2、VEGF的表达存在相关性(P<0.05 r= 0.453)。在对照组的正常内膜中Ang-2、VEGF的表达存在相关性(P<0.05 r=0.713)。5实验组腹腔液中Ang-2的表达水平与正常对照组相比显著升高(217±35.39、111.9±25.91),且两者之间有显著差异( P < 0.05) ,实验组Ang-2的表达水平增殖期与分泌期相比显著升高(239.4±23.58、181±8.76),且两者之间有显著差异( P < 0. 05)。结论:1 Ang-2和VEGF主要对实验组和对照组有促进血管生成的作用,有利于异位内膜形成新生血管而种植生长。2 Ang-2和VEGF在对照组、实验组的在位内膜和异位内膜三组中两两比较均有显著性差异,说明Ang-2、VEGF的过表达与子宫内膜异位症的发生发展有关。3 Ang-2在实验组的腹腔液中的表达水平显著高于对照组且两者之间有显著差异。4统计分析表明Ang-2、VEGF在子宫内膜异位症中的表达水平比正常内膜显著增高,表明两者与子宫内膜异位症的发生、发展密切相关。
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