【摘 要】
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研究目的:探讨肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)刺激后胃黏膜上皮细胞GES-1细胞间粘附分子1(Intercellular adhesion molecule 1,ICAM1)、血管细胞黏附分子
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研究目的:探讨肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)刺激后胃黏膜上皮细胞GES-1细胞间粘附分子1(Intercellular adhesion molecule 1,ICAM1)、血管细胞黏附分子1(Vascular cell adhesion molecule 1,VCAM1)表达变化,以及TFF1(Trefoil factor family 1,TFF1)过表达对GES-1细胞中TNF-α诱导的ICAM1、VCAM1表达的影响。研究方法:以永生化的胃黏膜上皮细胞株GES-1为研究对象,采用不同浓度的人重组TNF-α刺激该细胞株,RT-PCR和Western Blot方法检测不同时相ICAM1、VCAM1在mRNA和蛋白水平的表达变化;细胞免疫荧光检测刺激前后NF-κB(Nuclearf Factor-kappa B,NF-κB)p65蛋白的细胞定位情况。采用质粒重组的方法构建TFF1真核细胞表达质粒,将重组质粒pIRES2-EGFP-TFF1瞬时转染GES-1细胞,Western Blot检测转染前后TNF-α诱导性ICAM1、VCAM1的表达变化。研究结果:1.TNF-α可诱导GES-1细胞表达ICAM1、VCAM1,随着TNF-α浓度与诱导时间的增加,二者的表达量上调。2.TNF-α刺激后GES-1细胞中NF-κB p65蛋白呈现出从细胞质到细胞核的易位。3.重组质粒pIRES2-EGFP-TFF1瞬时转染GES-1细胞株,转染后的GES-1细胞可表达TFF1蛋白。4.TFF1过表达后GES-1细胞中TNF-α诱导性的ICAM1、VCAM1表达下降(p<0.05)。研究结论:在GES-1细胞中,TFF1过表达可显著减轻TNF-α诱导性ICAM1、VCAM1的表达,TFF1可能通过抑制黏附分子类蛋白的表达发挥抗炎、胃黏膜保护作用。
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