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背景和目的：压力性尿失禁(stress urinary incontinence, SUI)指腹压增加时尿液不自主溢出,是一种严重影响生活质量的中老年妇女常见慢性病,分娩损伤和雌激素水平低下是该病发病的两大诱因,然而其发病机制迄今未明。目前较公认的SUI发病机制相关学说——盆底整体理论和吊床假说认为,阴道前壁等尿道支撑组织的结构和功能缺陷导致了该病的发生。尿道支撑组织主要成分为结缔组织,由大量细胞外基质(extracellular matrix, ECM)和少量细胞组成；其中,成纤维细胞在介导以胶原为主要成分的ECM代谢中占据核心地位,但具体调控途径不明。丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)细胞信号传导通路是细胞应激和损伤反应的主要信号通路,该酶同时也是雌激素受体细胞信号传导通路主要激酶；其中,P44/42MAPK信号通路在人体许多组织成纤维细胞的分化、增殖以及合成ECM的过程中发挥关键作用。本研究拟通过采用免疫组化法观测女性尿道支撑组织磷酸化P44/42MAPK(p-P44/42MAPK)的定位表达,采用Western blot法观测SUI患者与非SUI患者之间尿道支撑组织p-P44/42MAPK的表达差异,明确尿道支撑组织P-P44/42MAPK表达与SUI发病的相关性；同时,通过女性尿道支撑组织成纤维细胞体外实验,采用RT-PCR和Western blot法观测P44/42MAPK特异性抑制剂干预对成纤维细胞合成胶原量的影响,探讨P44/42MAPK细胞信号传导通路在SUI发病机制中的作用。方法：1、临床实验：收集浙江大学医学院附属妇产科医院2010年1月至2011年1月收治的10例SUI患者(SUI组)和10例非压力性尿失禁妇女(对照组)的阴道前壁组织(即尿道支撑组织),所有组织标本来源于SUI患者行抗尿失禁手术时和非SUI患者因阴道前壁囊肿或宫颈癌手术时,取材于宫颈外口下方1cm-2cm处约0.5*1cm2的阴道前壁全层组织。采用免疫组化En Vision染色法检测组织中p-P44/42MAPK蛋白表达的定位,采用Western blot法检测组织中p-P44/42MAPK蛋白表达水平,比较SUI组和非SUI组之间尿道支撑组织p-P44/42MAPK蛋白表达的差异。2、细胞实验：用女性尿道支撑组织的新鲜标本组织块进行纤维细胞培养,体外构建女性尿道支撑组织成纤维细胞模型,予或不予P44/42MAPK特异性抑制剂PD98059干预,采用RT-PCR和Western blot法,检测Ⅰ/Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达水平,比较PD98059干预对成纤维细胞合成胶原量的影响。结果：1、免疫组化En Vision染色结果证实女性尿道支撑组织成纤维细胞、鳞状上皮细胞、血管内皮细胞中存在p-P44/42MAPK蛋白强表达,以细胞核和细胞质表达为2、经t检验和χ2检验,SUI组和对照组两组之间患者年龄、产次、分娩方式、绝经与否和体重指数均无显著性差异；对照组尿道支撑组织p-P44MAPK蛋白和p-P42MAPK蛋白表达量分别为71.93±15.01和76.54±15.32；SUI组尿道支撑组织p-P44MAPK蛋白和p-P42MAPK蛋白表达量分别为21.65±7.04和40.44±18.95,经t检验,SUI组尿道支撑组织p-P44MAPK和p-P42MAPK蛋白表达量均显著下降(p均<0.05)。3、PD98059干预前,体外培养的女性尿道支撑组织成纤维细胞Ⅰ型胶原的mRNA和蛋白表达量分别为9.82±0.13和12.08±0.95,Ⅲ型胶原的mRNA和蛋白表达量分别为8.16±0.11和13.72±1.47；PD98059干预后,体外培养的成纤维细胞Ⅰ型胶原的mRNA和蛋白表达量分别为7.08±0.11和8.68±0.84,Ⅲ胶原的mRNA和蛋白表达量分别为6.00±0.07和10.94±1.76；经t检验,P44/42MAPK特异性抑制剂PD98059干预后,成纤维细胞中Ⅰ型和Ⅲ胶原的mRNA和蛋白表达量均显著下降(p均<0.05)。结论：1、女性尿道支撑组织存在磷酸化P44/42MAPK蛋白表达；2、SUI患者尿道支撑组织中磷酸化P44/42MAPK蛋白表达水平明显降低,提示P44/42MAPK细胞信号通路与SUI发病相关；3、P44/42MAPK特异性抑制剂PD98059干预后,体外培养的女性尿道支撑组织成纤维细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达量明显下降,推测P44/42MAPK细胞信号通路参与SUI发病的机制可能与该通路活性下调、引起成纤维细胞介导的胶原合成减少、导致细胞外基质代谢障碍有关。