γ射线照射对培养小鼠骨髓基质细胞IL-6基因表达影响及机理研究

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该课题通过体外培养小鼠骨髓基质细胞,以8.0Gy<60>COγ射线照射为放射损伤模型 ,观察辐射对培养骨髓基质细胞内IL-6的基因及蛋白表达的影响,并进一步通过检测核转录因子NF-γB活性及蛋白表达来探讨其机制.方法:该研究用Dexter方法体外培养的小鼠骨髓基质细胞为研究对象,用放射免疫分析和逆转录聚合酶链式反应的方法分别检测辐射后各时相点白细胞介素-6的蛋白及基因表达;以免疫组织化学、凝胶电泳迁移率实验、免疫印迹实验分别检测NF-γB的核移位、DNA结合活性、蛋白表达;并用NF-γB抑制剂处理后再观察IL-6的基因表达.结论:1.体外分离、培养的骨髓基质细胞可用于骨髓造血微环境的放生物学 研究.2.γ射线照射能够激活BMSCs IL-6基因转录,使细胞分泌白细胞介素-6增多,这可能有利骨髓腔内残留造血干细胞的增殖、分化、动员;另一方面,它可能与放射损伤后期造血功能长期不能恢复及骨髓纤维化有关.3.γ射线照射能够引BMSCs内NF-γB蛋白表达升高并 激活,且使其向细胞核内移位启动基因的转录.同时这也可能参与BMSCs抵抗辐射引起凋亡 的机制.4.γ射线照射能够引起的BMSCs内IL-6表达高与NF-γB的活化有关.
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