哈萨克羊和中国美利奴羊DRB1基因SSCP多态性与细粒棘球蚴病遗传抗性的关联分析

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细粒棘球蚴病(Cystic Echinococcosis, CE)又称包虫病,是由细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus, E.g)的幼虫(续绦期)寄生在各种中间宿主(人和食草动物如牛、羊)的肝脏、肺脏等器官内发育为包囊引起的一种人畜共患病。新疆是我国重要的畜牧业生产基地,包虫病已经成为新疆最严重的一种危害人类健康的地方流行病,给新疆畜牧业生产造成很大损失。近年来,世界各国对包虫病的研究已经深入到细胞和分子水平,并取得了很大成就,其发病率已明显下降,但要从根本上控制和消灭这种疾病却非常困难。主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex,MHC)是由紧密连锁、高度多态的基因位点所组成的复合体,广泛存在于脊椎动物中。MHC分子主要与外来抗原相结合并将这些抗原递呈给T淋巴细胞,最终引起机体的免疫反应,因此,MHC与许多疾病的抗性、易感性、免疫应答以及生产性能都有密切关系。MHC作为疾病的抗性和易感性的候选基因,已经成为当今分子免疫遗传的研究热点之一。本研究通过对哈萨克羊和中国美利奴羊(新疆军垦型)的MHC-DRB1基因多态性进行研究,并探讨MHC-DRB1基因与包虫病的相关性,为利用标记辅助选择选育绵羊抗病新品种以及进一步研究MHC的抗病机理打下前期基础,试验结果如下:1.采用巢式PCR-SSCP对200只哈萨克羊和205只中国美利奴羊(其中各有100只和105只绵羊感染了包虫病)的MHC-DRB1第2外显子进行多态性研究,实验结果表明,哈萨克羊和中国美利奴羊的MHC-DRB1基因第2外显子均存在丰富的多态性,两品种绵羊均检测出15个等位基因,基因型分别有37和41种。2.对哈萨克羊和中国美利奴羊包虫病阴性羊和阳性羊的MHC-DRB1等位基因频率和基因型频率分别进行比较分析,结果显示哈萨克羊中等位基因B、H和F(P<0.01)与细粒棘球蚴病抗性相关;基因型FF和GH(P<0.05)与细粒棘球蚴病抗性相关;等位基因K和G(P<0.01)与细粒棘球蚴病易感性相关;基因型GG(P<0.01)和KK(P<0.05)与细粒棘球蚴病易感性相关。中国美利奴羊群体中等位基因D(P<0.05)与细粒棘球蚴病抗性相关;基因型LG(P<0.05)与细粒棘球蚴病抗性相关;等位基因K(P<0.05)与细粒棘球蚴病易感性相关;基因型GF(P<0.05)与细粒棘球蚴病易感性相关。3.χ2适合性检验结果表明,哈萨克羊和中国美利奴羊检测群体的MHC-DRB1基因第2外显子的SSCP带型均未达至Hardy-Weinberg平衡(P<0.01)。4.对两绵羊品种部分基因型进行克隆测序,结果表明MHC-DRB1基因外显子2存在多位点碱基突变,大部分导致了氨基酸的变异。
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