粘细菌的分离纯化、鉴定及生物活性物质的筛选研究

来源 :河北大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:RedCandleCalmFire
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粘细菌(myxobacteria)是原核生物中一类可滑行的革兰氏阴性真细菌,形态特殊复杂,能够在细胞间通过信号的传递与感应,协同摄食、运动和发育形成子实体和抗逆性强的粘孢子,具有明显的社会学特征。鉴于粘细菌能产生丰富的结构特殊而新颖的生物活性物质,而且具有其他微生物的代谢物所不具备的活性作用机制,使粘细菌成为目前新药研发的一类重要药物资源菌。  本研究通过处理来自河北(保定、迁徙、平泉、兴隆和遵化)、福建(福州和漳州)、云南(昆明)不同地区的230个样品,在经典的粘细菌分离纯化方法的基础上,针对粘细菌的生物学特性进行了方法上的改进,共分离出200株粘细菌纯培养物,其中29株具有纤维素降解活性。对其中40株粘细菌纯培养物进行了系统发育分析,初步确定了其系统发育地位。另外,本研究还对部分粘细菌菌株的生物活性物质进行了筛选。  对40株粘细菌纯培养物16S rDNA系统发育分析,将37株归属于粘球菌属(Myxococcus)、1株归属于珊瑚球菌属(Corallococcus)和2株归属于匣状球菌属(Pyxidicoccus)。  对所得到的粘细菌纯培养进行了生物活性产物的筛选,采用3种以甲醇为唯一碳源的培养基对60株粘细菌菌株进行摇瓶培养发酵,采用光谱学分析法及HPLC法筛选发酵液中的吡咯喹啉醌,获得2株甲醇利用型吡咯喹啉醌产生菌,均归属于粘球菌属(Myxococcus);以香豆素为模型,从100株粘细菌中筛选到1株具有降解黄曲霉毒素潜在能力的菌株,16S rDNA序列系统发育分析结果显示它与变金黄粘球菌(Myxooccus flavescens)相似度最高。其中菌株95032不仅可以产生吡咯喹啉醌,还具有黄曲霉毒素降解潜力。  以葡萄糖(Glu)、海藻糖(Fuc)、脱氧核糖(Rib)、果糖(Fru)、半乳糖(Gal)、甘露糖(Man)、木糖(Xyl)、赤藓糖(Ery)、鼠李糖(Rha)、阿拉伯糖(Ara)、山梨糖(Sor)、半乳糖醛酸(Gal acid)和半乳糖醇(Galactitol)为单糖标准品,采用HPLC-蒸发光散射检测法和柱前PMP-HPLC法,对4株供试菌株的胞外多糖水解液进行检测。研究结果表明,4株供试粘细菌胞外多糖的主要单糖组分为:葡萄糖(Glu)、甘露糖(Man)、果糖(Fru)、半乳糖(Gal),且Glu在中含量比较高。
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