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研究目的 通过建立7日龄SD大鼠HIBD模型,观察新生大鼠HIBD脑组织皮质NO含量变化、FasL蛋白表达状况以及细胞凋亡情况,并用硫酸镁进行干预治疗,观察其中新生大鼠HIBD脑组织皮质NO含量变化、FasL蛋白表达以及脑细胞凋亡的影响,以探讨硫酸镁对新生大鼠HIBD的干预治疗作用以及有关病理生理机制,为硫酸镁治疗新生儿HIE提供理论依据。 研究方法 实验动物分组处理 1、NO含量测定组:24只7日龄新生大鼠随机分为3组,每组8只。一组为硫酸镁干预组,首先用Rice方法建立新生大鼠HIBD模型,于结扎左侧颈总动脉后恢复2~3小时,缺氧后腹腔注射25%硫酸镁300mg/kg,每6小时1次,共3天。第四天断头取脑,用左侧脑皮质匀浆作NO含量测定;二组为生理盐水对照组,基本方法如上,生理盐水腹腔注射剂量为10ml/kg,每6小时1次,共3天;三组为假手术组,单纯游离左侧颈总动脉不结扎,不缺氧,其余方法如上。 2、免疫组化测定及TUNEL脑细胞凋亡测定组:24只7日龄新生大鼠随机分为3组,分组方法同上,于第4天取脑,中性甲醛固定、脱水、透明、包埋和切片,采用免疫组化SP方法染色,检测各组皮质部位FasL蛋白的表达;将另一部分同类切片,采用TUNEL染色方法,检测各组脑皮质的细胞凋亡情况。 硫酸镁对缺氧缺血新生大鼠脑保护作用的实验研究 中文提要 研究结果: l、与假手术组相比,生理盐水对照组脑皮质组织匀浆NO的测定含 量在 4天明显增加k<0.05);与生理盐水对照组相比,硫酸镁干预组 脑皮质组织匀浆 NO的测定含量在 4天明显减少b<0.0 5人 2、与假手术组相比,生理盐水对照组结扎侧脑皮质部位FasL在蛋 白水平上,4天表达增加明显…<0.05);与生理盐水对照组相比,硫酸 镁干预组结扎侧脑皮质部位FasL在蛋白水平上,4天表达减少明显中 <0.05)。 3、与假手术组相比,生理盐水对照组结扎侧脑皮质部位脑细胞凋亡 情况在4天很明显b硼.05);与生理盐水对照组相比,硫酸镁干预组结 扎侧脑皮质部位脑细胞凋亡情况在4大减轻b狈.05地 研究结论: 1、新生大鼠HIBD结扎侧脑组织皮质部位NO代谢产物水平在4天明 显增高。 2、硫酸镁能抑制新生大鼠HIBD结扎侧脑皮质部位NO的产生。 3、新生大鼠HIBD后,4天结扎侧脑皮质FasL蛋白表达增高。 4、硫酸镁能抑制新生大鼠HIBD结扎侧脑皮质FasL蛋白的表达。 5、新生大鼠HIBD后,4天结扎侧脑皮质部位脑细胞凋亡明显。 6、硫酸镁能抑制脑细胞的凋亡。