论文部分内容阅读
瘦素(leptin, LEP),是一种主要由脂肪细胞分泌的激素类细胞因子,具有广泛的生物学功能,其主要功能是脂类代谢的重要调控激素。本实验克隆和分析了黄颡鱼leptin及其相关基因的结构和表达,并初步阐明在黄颡鱼卵巢发育过程中leptin对其脂肪动员及卵巢发育的相关作用。1.黄颡鱼leptin, leptin receptor (LEPR)及leptin receptor overlapping transcript (LEPROT)基因cDNA全长序列分别为1191bp,4195bp和827bp,分别编码172,1086和130个氨基酸(amino acid, aa)。同时,构建leptin及其相关基因的进化树,并分析其蛋白结构。通过荧光实时定量PCR,以p-肌动蛋白为内参照研究黄颡鱼不同组织LEP, LEPR及LEPROT基因的表达水平。结果表明,黄颡鱼leptin及其相关基因在所有被检测组织中均有表达,LEP在肝脏组织中表达量最高；LEPR及LEPROT基因在体内组织分布类似,最高表达量组织是脑垂体。2.黄颡鱼卵巢发育过程中相关指标(包括形态学参数,粗脂肪含量,脂类代谢关键酶活性、mRNA丰度及leptin与其受体基因的表达水平)的变化规律及相关关系的结果分析表明,黄颡鱼卵巢发育过程中脂类代谢的途径包括两个时期：第一个时期是在各个脂肪存储组织中通过肝脏脂肪的转移、食物获取或者脂肪生成进行脂肪的累积,第二个时期是这些存储组织中脂肪的消耗,通过抑制摄食、脂肪分解和脂肪向卵巢的转移进而减少脂肪存储组织的脂肪量。肝脏、脑和卵巢组织中leptin基因的mRNA水平在第Ⅲ期达到峰值,与此同时,黄颡鱼体内脂类代谢活跃,说明leptin作为机体脂肪储存信号传达到脑组织,从而调控脂肪累积,保证卵巢发育过程中的能量需求。Leptin及其受体在各组织不同期的差异性,说明其对卵巢的发育及脂肪动员有重要影响作用,而脑组织中leptin及其受体基因的表达量在第V期时呈现下降趋势,表明此时leptin作为脂肪存储信号完成了脂肪的最大存储量,黄颡鱼开始进行产卵。通过对黄颡鱼卵巢发育过程中的相关研究表明,leptin在卵巢发育过程脂类代谢途径中起到了不可或缺的作用,为黄颡鱼卵巢发育中脂类代谢调控机制的研究提供了有力的理论基础和科学依据,