人源Sar1蛋白在COPⅡ小泡形成过程中生成双体的研究

来源 :中国科学院生物物理研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:adongjie
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Sar1(Secretion-associated and Ras-related)蛋白和Arf1(ADP-ribosylationfactor)蛋白分别调控COPⅡ衣被小泡与COPⅠ衣被小泡的形成,并且二者的作用方式相似。小G蛋白与GTP结合时,为激活状态,具有生物活性,而与GDP结合时,则为非激活状态,没有生物活性,这个循环过程由特异的鸟苷酸交换因子和GTP酶激活蛋白所调控。而COPⅠ和COPⅡ装配和解离则由这两个小G蛋白的循环所调控。   最近的研究表明,Arf1蛋白结合GTP活化时,在膜上形成双体,并且Arf1-GTP这种二聚化对于COPⅠ小泡的形成是必需的。因此我们推测:在COPⅡ小泡形成过程中,Sar1蛋白在膜上形成双体,并且Sar1的双体对于COPⅡ小泡的形成是必需的。   将重组的人Sar1a、Sar1b蛋白与模拟内质网的脂质体、GTPγS,化学交联剂共同孵育。将脂质体结合的物质利用蔗糖梯度离心的方法分离出来并用Westernblotting检测,带有化学交联剂的反应组出现了Sar1双体条带。证明了在GTP存在的条件下,Sar1可以在脂质体上形成双体,为进一步研究Sar1双体在COPⅡ小泡形成过程中作用的机制奠定了基础。
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