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目的:观察端粒酶核酶抑制鼻咽癌细胞系CNE-2Z端粒酶活性后对肿瘤细胞周期、细胞增殖能力、细胞凋亡及相关基因表达的影响,并分析其可能机理,为进一步进行端粒酶核酶抑制实体瘤实验提供理论依据.方法:设计合成含有针对端粒酶hTR部分的锤头状核酶的真核表达质粒PAT-GFP-TeloRZ-7.1及对照质粒,通过电转染的方式将其导入低分化鼻咽癌细胞株CNE-2Z中(WHO分型:分化型非角化性癌),通过puromycin筛选和克隆纯化,流式细胞仪检测获得高表达报道基因GFP的细胞克隆,用TRAP-ELISA法检测各克隆株的端粒酶活性,RT-PCR法检测hTR含量,细胞体外增殖实验、细胞平板克隆形成实验、流式细胞仪分别检测细胞增殖、细胞周期分布和凋亡等细胞生物学行为,免疫组化法检测p53、p21、bcl-2、c-myc、PCNA等基因的表达.结果:(1)成功转染了PAT-GFP-TeloRZ-7.1质粒的CNE-2Z细胞克隆(7.1细胞)有绿色荧光蛋白GFP的表达;(2)7.1细胞的hTR含量减少,同时伴随端粒酶活性的明显下降;(3)7.1细胞的生长速度较CNE-2Z细胞有所下降,7.1细胞和CNE-2Z细胞PI指数比较有明显差异;(4)7.1细胞克隆形成率和CNE-2Z细胞相比明显降低(P<0.05);(5)最早在转染后第36天,7.1细胞出现凋亡,平均凋亡率8:16％,CNE-2Z细胞未出现凋亡.(6)免疫组化法显示7.1细胞突变型p53、PCNA、c-myc、bcl-2等基因的表达较CNE-2Z细胞降低,而p21基因的表达增加.结论:(1)端粒酶核酶基因成功导入CNE-2Z细胞并发挥作用,导致端粒酶活性下降;(2)端粒酶核酶通过抑制端粒酶活性使突变型p53表达下降,p21表达升高,c-myc、PCNA表达下调,从而使细胞周期阻滞和增殖能力下降;(3)端粒酶核酶通过抑制端粒酶活性使bcl-2基因表达下调而诱导细胞凋亡.