论文部分内容阅读
运用高密度寡核苷酸芯片建立大鼠胰腺发育不同阶段(胚胎(E)12.5，E15.5，E18.5，新生和成年)的基因表达谱，经过生物信息学数据分析发现许多与胰腺功能相关的基因在E18.5相对高表达，提示胚胎发育后期胰腺功能正趋于完善和成熟，这个时期是形成典型胰腺结构的关键阶段，而胰腺结构是胰腺发挥正常生物学功能的基础。本研究从基因表达谱中筛选出NBC1(electrogenic Na+-HCO3-cotransporter)在E18.5相对性高表达，旨在初步探讨NBC1在胰腺发育不同阶段的表达及组织细胞学定位。
运用RT-PCR技术进一步检测NBC1在大鼠胰腺发育不同阶段的mRNA表达水平，结果显示NBC1基因表达趋势与基因芯片检测结果相同；分别用蛋白免疫印迹及免疫荧光技术检测NBC1蛋白在大鼠胰腺发育不同阶段(胚胎(E)E15.5、E18.5、新生后(P)0、P7、P14、P21和成年(Adult))的表达及细胞组织学定位，结果显示NBC1在大鼠胰腺发育E15.5开始出现表达，E18.5特异表达出现最高峰，新生下降直到P7第一个表达最低点，生后P14又上升形成第二个高峰，之后下降直到成年形成第二个表达最低点。NBC1在胰腺的组织细胞学定位随着胰腺发育阶段的变化而变化；胚胎期弥散分布在胰腺内、外分泌细胞；新生之后随着胰腺结构的清晰可辨可发现NBC1表达在外分泌腺泡基底侧膜和顶侧膜及胰岛α、β细胞膜，与腺泡细胞相比在成年期NBC1更集中于β细胞。
以上实验结果表明NBC1在胚胎发育中后期和胰岛重塑高峰期相对高表达。提示NBC1在胰腺发育过程中可能与胰腺结构形成及其功能发挥相关。