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目的:SEI-1是一个近年来发现的新的癌基因,定位于19q13.1,该区域是卵巢癌,乳腺癌,肺癌等恶性肿瘤的常见染色体高扩增区。双微体是基因扩增的主要遗传学标志,常携带癌基因,并与衰老、基因组不稳定性、恶性肿瘤的形成密切相关。SEI-1基因有致瘤性,并能够诱导双微体形成。本研究的目的是建SEI-1诱导双微体形成模型,初步探讨SEI-1诱导双微体形成的机制。 方法:构建SEI-1真核表达载体,转染小鼠成纤维细胞NIH-3T3,接种到裸鼠皮下,建立SEI-1致瘤模型,并将肿瘤在裸鼠体内传代。将瘤细胞进行原代培养,中期染色体制备,核型分析。应用a-CGH筛选出肿瘤细胞中高扩增的基因,并应用Real-time PCR进行验证,将包含高扩增基因的BAC克隆标记为探针,FISH验证其确切扩增方式。 结果:SEI-1可以诱导肿瘤形成,肿瘤中的染色体数目增加,标记染色体增多,并出现了双微体。随着肿瘤在裸鼠体内传代次数的增加,双微体数目明显增多。芯片结果显示Met、Cav2、Cav1、Fam3c、Ing3、Kcnd2、Tspan12、St7、Wnt16等基因在肿瘤细胞中存在高扩增,Real-time PCR验证Met、Fam3c、Tspan12等基因随SEI-1表达增高而增高,FISH结果显示Met、Fam3c、Tspan12等基因是以双微体形式扩增。 结论:SEI-1能够诱导裸鼠体内肿瘤发生和肿瘤细胞内双微体形成;基因Met、Fam3c、Tspan12、Ing3、A430107013Rik,、Wnt16、St7等以双微体的形式扩增,其中Fam3c、Tspan12、Met、A430107O13Rik,、Wnt16同时存在高表达。