【摘 要】
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为了研究多巴胺和腺苷受体在细胞水平上的相互作用,我们克隆并在HEK293细胞系中表达了人多巴胺D1、D2受体和腺苷A1、A2a受体.在证实了这些表达的受体具有功能后,我们进行了以
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为了研究多巴胺和腺苷受体在细胞水平上的相互作用,我们克隆并在HEK293细胞系中表达了人多巴胺D1、D2受体和腺苷A1、A2a受体.在证实了这些表达的受体具有功能后,我们进行了以下研究.1.用稳定表达人多巴胺D1受体的HEK293细胞系,我们进行了放射配体结合、cAMP水平、CRE-SEAP报告基因活性和细胞内钙水平等功能分析,结果发现D1受体激动剂SKF38393对CRE-SEAP报告基因活性和引起cAMP水平增加的EC50值无显著差别.2.用稳定表达人腺苷A1受体的HEK293细胞系,我们研究了腺苷脱氨酶对腺苷A1受体功能的调节作用,结果表明腺苷脱氨酶对于腺苷A1受体高亲和状态的存在是必须的.3.用共表达人多巴胺D1受体和人腺苷A1受体的HEK293细胞,我们研究了腺苷A1受体对多巴胺D1受体的调节作用,结果发现,在共表达细胞中,A1受体激动剂CPA的存在可以提高D1受体拮抗剂[3H]SCH23390和D1受体结合的KD值,但不明显改变Bmax值.D1受体激动剂SKF38393对D1受体拮抗剂[3H]SCH23390的竞争抑制实验表明,A1受体激动剂CPA的存在可以提高D1受体激动剂SKF38393的IC50值,且呈浓度依赖性.CRESEAP报告基因活性分析和细胞内钙水平分析也都表明A1受体激动CPA可以提高D1受体激动剂SKF38393的EC50值.4.用共表达人多巴胺D2受体和人腺苷A2a受体的HEK293细胞,我们研究了腺苷A2a受体对多巴胺D2受体的调节作用.A2a激动剂CV1808的存在对D2受体拮抗剂[3H]raclopride和D2受体结合的Bmax值和KD值无明显影响.D2受体激动剂溴隐亭(Bromocriptine)对[3H]racloprid的竞争抑制实验表明,低浓度A2a激动剂CV1808对溴隐亭的IC50值无明显影响,但高浓度A2a激动剂CV1808可以提高溴隐亭的IC50值.
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