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肌病、缺血性心肌病和II型糖尿病等疾病都是由肌细胞缺陷造成的，且目前均无有效的治疗手段。近期，通过肌母细胞移植能够有效的缓解或治疗这些疾病。肌母细胞是一种单能干细胞，它能够定向分化为肌细胞，而且在其富集后能够互相融合最终分化为新的肌纤维，并且移植后的肌母细胞能够产生收缩蛋白，增强骨骼肌和心肌收缩功能，因此在治疗肌病和心肌梗死等肌细胞功能不全的疾病过程中，具有良好的疗效；另外，由于移植的肌母细胞能够和受体细胞天然融合，通过将正常肌母细胞中的核移植至受体细胞，能够在基因组层面上进行治疗，从而治疗II型糖尿病等基因缺陷型疾病。目前，肌母细胞的分离纯化方法尚处于研究阶段，距离其临床应用仍需要大量的研究工作。因此，本课题的研究目的即以Wistar大鼠为模型，建立分离纯化能够应用于临床治疗的肌母细胞的方法，主要研究结果主要有以下几个方面：1．本研究利用混合酶分步消化的方法，成功的从小鼠的四肢肌肉群中分离出了原代肌母细胞，并利用差速贴壁法对分离出的肌母细胞进行纯化，纯化率高达90%以上，建立了原代肌母细胞体外培养体系。2．根据肌母细胞特异性表达蛋白Desmin，分别从基因水平和免疫水平对分离出的细胞进行鉴定，确定为肌母细胞。3．成功的构建了flrg-pcDNA3.1(-)表达质粒，转入肌母细胞后，利用qRT-PCR和western blotting实验分别检测flrg基因和FLRG蛋白的表达量，证明flrg基因和FLRG蛋白成功过表达，成功构建了flrg转基因细胞株。4．利用细胞计数和流式细胞仪检测细胞周期方法，确定了flrg转基因细胞株细胞增殖能力提高，转染后的肌母细胞处于S期的比例比未处理的肌母细胞处于S期的比例要高一倍左右，这表明，FLRG蛋白是通过加速细胞从G0/G1期到S期的过渡来促进肌母细胞的增殖，具有促进肌母细胞增殖的作用。