Human Arrest Defective1(hARD1)是一个与酵母细胞ARD1蛋白同源、从酵母到高等哺乳细胞都很保守的蛋白，它具有N-乙酰基转移酶活性，对蛋白质进行翻译后的N-乙酰基化修饰。已有的研究确定它与细胞增殖和某些肿瘤发生有关，但其作用机制至今还不清楚。作为N-乙酰基转移酶，确定hARD1的乙酰化修饰靶蛋白是研究其功能以及作用机制的重要环节，但至今没一个ARD1的靶分子被完全确定。　　 本研究通过Westernblot检测MCF-7细胞，435细胞，293T细胞，Hepg2细胞，U251细胞，Hela细胞6种细胞的hARD1蛋白和P53蛋白表达水平，发现hARD1在6种细胞中均有表达，其中MCF-7细胞，293T细胞，Hepg2细胞表达最强。而在MCF-7细胞，435细胞，293T细胞，U251细胞P53均有表达，其中MCF-7细胞，293T细胞表达最强，而在Hepg2细胞，Hela细胞不表达。由于hARD1和P53蛋白在293T细胞中均表达最强，本研究以293T细胞为材料，通过免疫共沉淀的方法，发现hARD1蛋白和P53蛋白有内源的相互作用。随后构建p53/pEGFPN3真核表达质粒，在293T细胞中表达。此外，将hARDl/flag重组质粒转染到293T细胞中，表达外源的hARD1蛋白。过强表达hARD1，P53蛋白翻译水平没有变化，过强表达P53，ARD1蛋白翻译水平也没有变化，说明两者的相互作用不会影响彼此蛋白水平的变化。乙酰化水平监测发现过强表达hARD1后，P53蛋白乙酰化表达水平也增强，暗示hARD1蛋白对P53蛋白具有乙酰化修饰作用。泛素化检测发现，过强表达hARD1后，P53蛋白的泛素化水平也有一定水平的增强，但并没有导致P53蛋白水平发生变化，表明P53蛋白泛素化并没有导致其降解。本研究的结果为ARD1的生物学功能研究和乙酰化修饰的生物学意义提供了有价值的信息，也为进一步阐明hARD1在肿瘤发生中的作用机制研究提供了实验依据。