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松树萎蔫病是重要的林木病害之一,前期研究发现不同来源的松材线虫虫株在致病力上存在着很大的差异,而这种致病力的差异和线虫携带的细菌有关。本试验通过研究美国松材线虫携带的细菌,希望能从中筛选出在中国松材线虫上生存能力强且毒性低的细菌,释放到自然界,替代中国松材线虫携带的强致病力细菌,最终达到降低中国松材线虫致病力的目的。主要研究结果如下:1、对两株美国松材线虫Am-Bx1和Am-Bx2携带的细菌进行分离纯化,得到10株细菌菌株;统计了各菌株菌落出现的比率,确定MG3、MG4和MG5三株细菌为Am-Bx1携带的优势细菌,MG8和MG9两株细菌为Am-Bx2携带的优势细菌。2、为筛选在线虫上生存能力强的细菌菌株,用荧光假单胞菌与从美国松材线虫携带细菌菌株进行对峙试验。筛选出MG4、MG5、MG8和MG9为在中国无菌松材线虫上生存能力强的细菌。而在普通的液体培养基上,这四株细菌的对峙能力却没有比荧光假单孢菌的对峙能力强。3、对MG4等4株细菌进行生物毒性测定,以病能力强的荧光假单胞菌作为对照菌。结果显示,用MG4等这4株细菌处理后的黑松苗,感病指数要低于用荧光假单胞菌处理后的黑松苗。另外,试验还发现不论是用细菌无细胞培养液处理松苗,还是用细菌与无菌线虫混合接种松苗,相同的细菌菌株对松苗致枯萎能力是一致的。4、对MG4等4株细菌进行耐药性标记,喷施在野生线虫上,测定其在线虫上的生存能力。结果表明4株细菌菌株均能在野生松材线虫上存活,其中MG5和MG8两株细菌能较好的在松材线虫上生长繁殖,而MG4和MG9两株耐药性突变株的生长能力相对较差。5、用细菌常规鉴定方法和16S rDNA序列分析比对法相结合,对MG4等4株细菌进行鉴定,最后的鉴定结果为:MG4菌株鉴定为代夫特菌(Delftia tsuruhatensis),MG5菌株鉴定为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida), MG8菌株鉴定为嗜麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia),MG9菌株鉴定为泛菌(Pantoea sp.)。