【摘 要】
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硫化氢(H2S)是一种重要的气体信号分子,与许多重要的生理病理过程息息相关。因此对其进行准确的检测十分重要。荧光分子探针能够将分子识别信息转换成仪器可测量的荧光信号,具
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硫化氢(H2S)是一种重要的气体信号分子,与许多重要的生理病理过程息息相关。因此对其进行准确的检测十分重要。荧光分子探针能够将分子识别信息转换成仪器可测量的荧光信号,具有灵敏度高、选择性好、操作简单和可实时原位检测(荧光成像技术)等优点,在H2S的检测中得到了广泛的关注。H2S特殊的化学性质如还原性、亲核性以及和Cu2+强的结合能力等常常被用于H2S荧光探针的设计。 荧光素由于具有较高的消光系数、较好的荧光量子产率、较长的发射光谱和易于修饰等优点,被广泛的应用于荧光探针的设计。本文利用H2S能够将叠氮还原成氨基,同时分子内关环,打开荧光素螺环的原理,设计合成了以荧光素为母体,叠氮基为H2S反应位点的“off-on”型荧光探针。探针自身以螺旋内酯的形式存在,几乎没有荧光。H2S将探针中的叠氮基还原生成含有氨基的中间体,继而发生分子内酰胺化反应,使酯键断裂,原位生成开环的荧光素分子,产生强荧光,同时伴随着颜色从无色到亮黄色的改变。该探针能够高选择性的识别H2S,常见阴离子和还原性硫醇分子几乎无干扰;在H2S浓度为0-50μmol/L的范围内,探针荧光强度和H2S浓度之间有很好的线性关系,对H2S的检测限为10μmol/L。 2-(2-羟基苯基)苯并咪唑(HBI)是一种重要的荧光化合物,可以通过分子内质子转移(ESIPT)过程,发射双重荧光峰,具有Stokes位移大、荧光量子产率高的特点,因此在荧光检测领域应用广泛。如果对HBI结构中的羟基进行修饰,就会改变其ESIPT过程,导致分子的荧光性质发生相应的改变。基于上述原理,本论文通过在HBI羟基上引入苯呋咱(NBD)基团,设计合成了新型H2S荧光探针。由于H2S有较强的亲核性,使探针中NBD醚键发生硫解,重新生成了HBI分子,发出荧光。同时体系颜色由淡黄色变成紫色,能够对H2S进行可视化检测,可视化检测限为3μmol/L。探针对H2S表现出了良好的荧光选择性和很快的响应速度(5 min),在较宽的pH(6~9)范围内,仍然表现出较好的荧光性能,荧光检测限为6μmol/L。
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