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目的：通过研究NKX2.5基因在肺血减少型先心病患者中的突变及表达变化，初步探讨NKX2.5基因在肺血减少型先心病发病机制中的作用，为先心病患者的预防和治疗提供理论依据。方法：实验组：收集蚌埠医学院第一附属医院与安徽省立儿童医院心脏外科2012年5月至2013年5月收治的56例肺血减少型先心病患者术前外周静脉血及术中常规切除并留取右室流出道肥厚心肌组织，大小为0.5*0.5*0.5cm3，年龄在6个月至14岁，平均年龄为5.82±4.23岁。对照组：收集蚌埠医学院第一附属医院与安徽省立儿童医院心脏外科2012年5月至2013年5月收治的63例室间隔缺损患者术前外周静脉血及术中留取右室流出道切口右前壁或右室内异常肌束组织，大小为0.5*0.5*0.5cm3，年龄在6个月至14岁，平均年龄为6.93±4.56岁。采用聚合酶链反应结合DNA测序技术对NKX2.5基因的外显子进行序列检测，分析NKX2.5基因突变是否与肺血减少型先心病的发生有关；提取心肌组织RNA，以GAPDH为内参照，应用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测两组心肌中的NKX2.5基因mRNA表达变化并进行统计学分析。结果：1.采用聚合酶链反应结合DNA测序技术，所得PCR扩增产物的长度与设计的片段长度相吻合，其特异性亦较理想。产物纯化后应用美国ABI3130遗传分析仪进行毛细管电泳，将96孔板按照操作程序放入分析仪中自动进行测序，测序结果显示未出现异常峰型，与已知的NKX2-5基因位点进行比较，56例实验组与63例对照组的外周静脉血中均未检测出NKX2.5基因外显子发生突变；2.应用实时荧光定量PCR方法计算实验组NKX2.5mRNA的相对定量：用倍比稀释cDNA样品来扩增内参GAPDH和目的基因NKX2.5，计算出每一个稀释样品的内参与目的基因的稀释梯度值与ΔCt，在cDNA对数浓度与ΔCt关系曲线中，斜率为-0.0488，接近于0，即内参GAPDH与NKX2.5基因的扩增效率基本一致；根据cDNA的对数浓度与相应的Ct值，NKX2.5与GAPDH对应的相关系数分别为0.9987和0.9992，斜率分别为-3.3728和-3.4017，扩增效率分别为97%和98%，表明NKX2.5与GAPDH两者间有良好的线性关系，可以进一步计算出实验组心肌中NKX2.5基因mRNA表达的相对定量为0.5638±0.0051，说明实验组心肌中NKX2.5mRNA表达水平下降，利用SPSS17.0软件进行t检验两组之间表达水平的组间差异（p＜0.01），说明两组之间表达水平的差异具有统计学意义。结论：NKX2.5基因突变的发生因素可能与多因素有关；肺血减少型先心病的发生可能与心肌组织中NKX2.5基因表达下降有关。