研究目的:　　 肺腺癌是呈腺管样或乳头状结构的肺部恶性肿瘤，约占肺癌的20％～30％，可较早发生转移，女性相对多见，目前该病的病因及发病机制尚未完全明确。目的分子靶向治疗已经成为目前肺癌治疗研究的热点。分化抑制因子3(Id3)是一种重要的转录调控因子，参与肿瘤发生、细胞增殖和凋亡等过程。本实验室的前期研究结果表明，Id3基因在人肺腺癌A549细胞中呈低水平表达，外源性Id3在A549细胞中的转基因表达可抑制细胞增殖并诱导其凋亡。本文拟在此基础上，进一步研究Id3转基因表达对A549细胞迁移性、侵袭性的影响，并探讨其可能的分子机制。　　 研究方法:　　 在本实验室前期克隆人Id3基因、构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与Id3融合基因真核表达载体pEGFP/Id3的基础上，用脂质体转染技术将pEGFP/Id3导入A549细胞，荧光显微术观察细胞内EGFP-Id3融合蛋白表达情况;半定量RT-PCR分析转染后A549细胞内Id3mRNA的表达情况;细胞划痕试验和侵袭小室法检测Id3基因对A549细胞迁移和侵袭能力的影响;明胶酶谱法检测细胞内MMP2和MMP9的分泌情况;CCK-8法和平板细胞克隆形成试验测定Id3对A549细胞增殖功能的影响;DAPI和hoechst33258染色观察Id3对A549细胞凋亡作用的影响。在此基础上，用Agilent基因表达谱芯片筛选Id3基因转染前后A549细胞内的差异表达基因，初步研究Id3基因影响A549细胞凋亡和生长的分子机制。　　 研究结果:　　 成功将pEGFP/Id3表达载体导入A549细胞，使EGFP-Id3融合蛋白在A549细胞内得到高表达，荧光显微镜下可见转染pEGFP/Id3的A549细胞核内发出强绿色荧光;RT-PCR结果显示转染后A549细胞内Id3mRNA表达水平明显升高;细胞划痕实验和侵袭小室法结果表明，Id3在A549细胞中的外源性表达可明显降低细胞的迁移和侵袭能力;明胶酶谱法显示转染后MMP2和MMP9的分泌量下降;CCK-8和平板克隆形成试验结果提示外源性Id3可以抑制A549细胞增殖;DAPI和hoechst33258染色显示Id3可提高A549细胞的凋亡率;基因表达谱芯片初步筛选出Id3基因转染前后A549细胞内与细胞生长和凋亡相关的差异表达基因。　　 结论:　　 外源性Id3基因在A549细胞中的表达可降低细胞的侵袭性和迁移性，进一步证实Id3基因在体外可抑制A549细胞增殖及促进A549细胞凋亡。通过基因表达谱芯片的方法初步阐明Id3基因抑制A549细胞增殖和诱导凋亡的分子调控机制。