论文部分内容阅读
目的：本研究旨在通过建立大鼠对比剂肾病(Contrast Induced Nephropathy;CIN)模型,使用阿托伐他汀和NAC对CIN大鼠进行干预,观察生化指标和肾脏结构的变化,探讨阿托伐他汀和NAC对大鼠CIN的保护作用及其作用机制。研究方法：1.制作大鼠CIN模型和分组：注射对比剂后48h或72h,大鼠Scr较基础值升高25%提示建模成功,将45只成年Wistar大鼠适应性喂养1周后,随机分为对照组(A组)、阿托伐他汀组(B组)和NAC组(C组),注射对比剂前3d和后2d,A组、B组、C组每天分别给予1.5ml生理盐水、阿托伐他汀(30mg/kg)、NAC(300mg/kg)灌胃；注射对比剂后72h处死,注射对比剂前和注射对比剂后48h和72h采血2m1检测血清肌酐(Scr)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平；处死后留双侧肾脏标本。2.标本处理：所有标本均行HE染色和免疫组化染色；分离肾脏皮、髓质,将皮质切成若干个1mm3的立方体用于电镜观察；部分肾组织ELISA法测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮(NO)水平；部分肾脏组织匀浆Western Blot法检测Bax和Bcl-2的蛋白表达；部分肾组织匀浆PCR法对VEGF mRNA表达进行半定量测定。结果：1.血清生化指标：术后48h,3组大鼠Scr、CRP、TNF-α水平较前均升高(P<0.05)；阿托伐他汀组、NAC组Scr、 CRP、TNF-α水平均低于对照组(P<0.05),且阿托伐他汀组术后48h TNF-α水平低于NAC组(P<0.05)。2. MDA、SOD和NO水平：(1)MDA的水平,阿托伐他汀组、NAC组均低于对照组,且阿托伐他汀组低于NAC组(P<0.05)；(2)SOD和NO水平,阿托伐他汀组、NAC组均高于对照组,且阿托伐他汀组高于NAC组(P<0.05)。3.Bax、Bcl-2蛋白表达：(1)对照组Bax蛋白表达高于阿托伐他汀组、NAC组(P<0.05),对照组Bcl-2蛋白表达均低于阿托伐他汀、NAC组(P<0.05)；(2)阿托伐他汀组、NAC组相比较,Bax、Bcl-2蛋白的表达,差异未见统计学意义。4. VEGF mRNA水平：阿托伐他汀组、NAC组VEGF mRNA水平低于对照组(P<0.05)；阿托伐他汀组和NAC组VEGF mRNA水平差异无统计学意义。5.肾脏病理形态变化：(1)光镜变化：对照组肾小管和肾间质可见大量炎症细胞浸润,肾小管上皮细胞严重肿胀、空泡样改变,肾小管管腔内可见大量管型,甚至闭塞。阿托伐他汀组、NAC组上述病变轻较,且阿托伐他汀组最轻；(2)电镜变化：对照组肾小管基底膜重度增厚,内皮细胞内线粒体肿胀严重、嵴排列紊乱、甚至消失,管腔面的微绒毛大量脱落,阿托伐他汀组、NAC组上述病变轻较,且阿托伐他汀组最轻；(3)免疫组化：3组均有TGFβ1表达,对照组、阿托伐他汀组、NAC组高表达比例分别为73.33%、26.67%、33.33%,阿托伐他汀组、NAC组与对照组相比较,TGFβ1表达均减弱(P<0.05)；阿托伐他汀组和NAC组TGFβ1表达水平差异未见统计学意义。结论：1.抗炎症、抗氧化应激可能是阿托伐他汀和NAC主要的肾保护机制。2.阿托伐他汀、NAC可能通过下调Bax蛋白表达和上调Bcl-2表达,减少肾小管上皮细胞的凋亡,对CIN的发生有一定的预防作用。3.阿托伐他汀、NAC还可减少VEGF、TGFβ1的过度表达,改善肾脏损害,可在一定程度上抑制CIN的发生。