目的:　　1.采用快速聚类分析方法探讨PBC中医证型分布特点，及与疾病进展之间的关系;　　2.基于核磁代谢组学研究PBC患者血清代谢组学特征，探索有诊断价值的生物标志物;　　3.观察胆淤方对胆汁淤积模型动物的疗效，明确胆淤方的量效关系和机制探讨。　　方法:　　1.根据PBC临床流行病学特征，制定自身免疫性肝病临床信息量表，采集患者四诊信息及实验室检查，构建一个独立的PBC临床信息数据库。对采集的中医症状信息进行赋值，排除各类混杂因素的干扰，使用快速聚类法对中医症状信息进行分析，依据中医证候诊断标准提取关键证候要素，综合概括中医证型。　　2.严格挑选初次诊断未治疗的PBC患者和经UDCA治疗生化应答佳的病例，基于核磁共振驰豫编辑实验序列和模式识别技术，检测患者血清代谢物，采用主成分分析区分各组之间的代谢谱，构建正向逐步Logistic回归模型以设计最佳的代谢物组合，ROC曲线评估优化模型在训练集和验证集中的准确性。　　3.通过改善造模方式、时间和剂量，摸索一种最佳的1，4-二氢-2，4，6-三甲基-3，5-吡啶二甲酸二乙酯(3，5-diethoxycarbonyl-1，4-dihydrocollidine，DDC)诱导的胆汁淤积动物模型，基于此模型研究胆淤方的药效、量效关系和机制。　　结果:　　1.(1)PBC的疾病特征:本研究共收集329例PBC患者，发病年龄主要集中在50～69岁，男∶女为1∶7.89;乏力是PBC患者的主要临床症状，脾肿大是其主要体征:肝功能以ALP、γ-GT和TBA水平升高明显;AMA或AMAM2阳性率高达89.97％;体液免疫以IgM水平升高明显。病理分期以Ⅲ期和Ⅳ期居多;临床分期主要集中在症状期;超声评分以3分和4分多见。(2)相关性分析显示临床分期与超声评分之间相关性弱(R=0.135，P＜0.05)，病理分期与临床分期之间的相关性较弱(R=0.244，P＜0.05)，病理分期与超声评分之间的相关性有高度统计学意义(R=0.624，P＜0.001)。(3)总胆汁酸水平与病理分期呈正相关，白蛋白、红细胞计数、白细胞计数和血小板水平与病理分期呈负相关。(4)快速聚类分析将329例PBC患者分为8种中医证型:脾气亏虚证(30.40％)、肝肾阴虚证(28.88％)、肝血虚证(14.59％)、肝气郁结证(13.98％)、气虚血瘀证(5.17％)、气阴两虚证(3.34％)、肝郁脾虚证(3.04％)和肝胆湿热证(0.61％)，排在前3位的证型包括脾气亏虚证、肝肾阴虚证和肝血虚证。(5)超声评分低时以肝气郁结证为主，超声评分高时以肝肾阴虚证和脾气亏虚证为主。(6)肝气郁结证的白蛋白水平明显高于其它证型(P＜0.05)，肝血虚证的总胆红素水平明显高于其它证型(P＜0.05)，脾气亏虚组和肝郁脾虚组的红细胞水平明显低于肝气郁结证(P＜0.05)，肝气郁结证的血小板水平明显高于其它证型(P＜0.05)。　　2.血清诊断标志物分析:(1)训练集纳入29例PBC患者、30例乙肝后肝硬化(HBV caused cirrhosis，HBC)患者和41例健康对照。29例PBC患者中有23例为初次诊断未治疗者，其它6例为使用UDCA治疗满1年且均有生化应答者。PBC和HBC患者的血清ALP、γ-GT、TBA、DBIL水平比较有统计学差异(P＜0.05)，其它实验室指标、年龄、肝脏超声评分和Child-Pugh评分比较无统计学差异(P＞0.05)。(2)主成分分析结果显示有25个差异代谢物可区分PBC和HBC患者，有33种差异代谢物可区分PBC和健康对照，有40种差异代谢物可区分HBC和健康对照，整合后共有45个代谢物用于区分3组患者。(3)代谢通路分析结果显示与PBC相关的15条代谢通路发生重编程，主要与葡萄糖、脂肪酸和氨基酸代谢通路相关。(4)UDCA治疗应答者和初诊未治疗的PBC患者在血清代谢物分布上无显著差异，两者无法区分。(5)采用Logistic回归和ROC分析构建的优化模型，用方程表示为(p)=-12.22-3.46*1og(4-羟基脯氨酸)+6.62*log(3-羟基异戊酸盐)-2.44*log(柠康酸)-3.80*log(丙酮酸盐)。该模型在训练集的AUC为0.937(95％置信区间(CI):0.868-0.976)，Youden指数J为0.754，灵敏度为69.23％，特异性为92.69％。(6)另纳入21例PBC患者、7例自身免疫性肝炎患者和9例HBC患者，作为验证集。该模型在验证集的AUC为0.890(95％CI:0.743-0.969)，Youden指数J为0.7024，灵敏度为95.24％，特异性为75.00％。　　3.(1)DDC诱导的动物模型具有显著的肝内胆汁淤积和炎症反应特点。(2)DDC与正常饲料以质量比0.7∶1000混匀后造模更适合药效研究。(3)生化结果:在ALT、AST水平上，GJ组下降明显，OCA组次之，DJ组较差;在ALP、TBA、TBIL水平上，OCA组下降明显，GJ组次之，DJ组较差;在ALB水平上，OCA组升高明显，GJ组次之，DJ组较差。(4)病理结果:汇管区炎症反应、胶原纤维沉积、胆管反应M组较N组明显加重，OCA组、GJ组和DJ组较M组明显减轻。M组FXR、BSEP和NTCP表达量均高于N组;OCA组FXR和BSEP表达量高于M组，NTCP表达量低于M组;GJ组FXR和BSEP表达量高于M组，但低于OCA组;NTCP表达量低于M组，但高于OCA组;DJ组FXR和BSEP表达量高于M组，但低于OCA组和GJ组;NTCP表达量低于M组，但高于OCA组和GJ组。　　结论:　　(1)PBC的中医证型与疾病进展有一定关系，早期以肝气郁结证常见，中晚期以肝肾阴虚证和脾气亏虚证多见。　　(2)PBC具有与疾病本身相关的代谢特征，由4-羟基脯氨酸、3-羟基异戊酸盐、柠康酸和丙酮酸盐这4种代谢物构建的组合模型可特异性地增加PBC的诊断性能。　　(3)胆淤方具有减轻肝内炎症反应和改善肝内胆汁淤积的作用，且高剂量组优于低剂量组，该作用可能与FXR、BSEP和NTCP表达有关。