健脾补肾方通过β-catenin信号通路抑制大肠癌侵袭转移的机制研究

来源 :上海中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ouyang000
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目的:  研究健脾补肾方对人肠癌细胞生长和侵袭转移的影响,探讨健脾补肾方通过β-catenin信号通路抑制大肠癌侵袭转移的机制。  方法:  以人肠癌LoVo细胞为研究对象,应用不同浓度的健脾补肾方干预,采用CCK-8法检测不同浓度健脾补肾方对大肠癌细胞生长的抑制作用;Transwell法检测低、中、高剂量(100、200、300μg/mL)健脾补肾方对其侵袭转移能力的影响;Western blot法检测其对人肠癌细胞核中的β-catenin蛋白表达;ELISA法检测其对人肠癌细胞培养上清液中VEGF和MMP-7的表达。  建立人肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,观察健脾补肾方(250、500、1000mg/kg/d)对裸鼠大肠癌肿瘤生长的抑制作用,以及对荷瘤鼠生存时间的影响;采用免疫组化Envision法检测其对裸鼠大肠癌肿瘤β-catenin蛋白的表达;ELISA法检测其对荷瘤鼠血清中VEGF和MMP-7的表达。  结果:  健脾补肾方能够抑制人肠癌LoVo细胞的生长,呈剂量依赖性。与对照组比较,健脾补肾方低、中、高剂量均能够抑制LoVo细胞的侵袭转移能力。Westernblot结果表明,健脾补肾方能够下调β-catenin信号通路关键分子β-catenin蛋白在细胞核的表达水平。ELISA结果显示,健脾补肾方能够以剂量依赖性方式分别下调LoVo细胞培养上清液中VEGF和MMP-7蛋白表达。  健脾补肾方能够抑制裸鼠人肠癌皮下移植瘤的生长,健脾补肾方低、中和高剂量组的瘤重抑制率分别为23.14%、47.93%和70.25%。健脾补肾方能够延长荷瘤鼠的生存时间,低、中、高剂量的健脾补肾方对荷瘤鼠的生命延长率分别为12.34%、26.19%和40.30%。健脾补肾方能够下调裸鼠肠癌瘤体中β-catenin蛋白和血清中VEGF、MMP-7表达。  结论:  健脾补肾方通过抑制人肠癌细胞β-catenin蛋白在细胞核中的表达水平,从而阻断β-catenin信号通路,下调下游靶基因VEGF和MMP-7表达,这可能是健脾补肾方抗大肠癌侵袭转移的作用机制之一。
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