论文部分内容阅读
本课题为黑龙江省自然基金资助课题(NO.TD2005-01)。目的是研究复方五味子素B对胃癌细胞株SGC-7901的增殖抑制作用，并探讨其胃癌抑制作用的分子机制，为复方五味子素B在胃癌防治方面的临床应用提供实验依据。
本研究分两部分：第一部分复方五味子素B各组成药及复方五味子素B对人胃癌细胞株SGC-7901增殖抑制作用研究
分组：空白对照组加培养基、阴性对照组加2‰DMSO、阳性对照组加5-氟尿嘧啶(50μg/ml)、药物组-五味子乙素、芦荟大黄素、黄芪多糖(每药物组分三个剂量：终浓度分别为25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml)；复方五味子素B低、中、高剂量组(以五味子乙素为标准，终浓度分别为25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml)；孵育12、24、48小时；方法：采用MTT法观察三种成分及复方五味子素B对人胃癌细胞株SGC-7901增殖抑制作用；计数法观察复方五味子素B对胃癌细胞分裂指数的影响；结果：①五味子乙素在25～100μg/ml浓度范围内作用24小时，对人胃癌细胞株SGC-7901的增殖均有明显的抑制作用(P＜0.05)；②芦荟大黄素在25～100μg/ml浓度范围内作用12小时，对人胃癌细胞株SGC-7901的增殖没有明显的抑制作用，作用24小时和48小时时能起到显著的抑制作用(P＜0.05)；③50μg/ml和100μg/ml的黄芪多糖作用24小时到48小时，对人胃癌细胞株SGC-7901的增殖均有明显的抑制作用(P＜0.05)。④25～100μg/ml复方五味子素B作用12～48小时，均能明显抑制胃癌细胞株SGC-7901的增殖和细胞分裂(P＜0.05)。
第二部分复方五味子素B对人胃癌细胞株SGC-7901增殖抑制机制研究实验一复方五味子素B对人胃癌细胞株SGC-7901细胞周期的影响
实验二复方五味子素B对人胃癌细胞株SGC-7901增殖细胞核抗原PCNA表达的影响
实验三复方五味子素B对人胃癌细胞株SGC-7901细胞周期蛋白cyclinD1mRNA表达的影响
分组：空白对照组加培养基、阴性对照组加2‰DMSO、阳性对照组加5-氟尿嘧啶(50μg/ml)、复方五味子素B中、高剂量组；孵育24小时；方法：①采用流式细胞术观察复方五味子素B对人胃癌细胞株SGC-7901细胞周期的影响；②采用免疫组化法观察复方五味子素B对人胃癌细胞株SGC-7901增殖细胞核抗原PCNA表达的影响；③用RT-PCR法观察复方五味子素B对人胃癌细胞株SGC-7901中细胞周期蛋白cyclinD1mRNA表达的影响。结果：①对细胞周期影响：与DMSO组相比，复方五味子素B(50～100μg/ml)能使胃癌细胞株SGC-7901的G0-G1期细胞增多，使S期和M期的细胞明显减少，细胞增殖抑制率明显增高(P＜0.05)；②对增殖细胞核抗原PCNA表达的影响：与DMSO组相比，复方五味子素B(50～100μg/ml)作用于胃癌细胞株SGC-7901，使其PCNA的表达明显降低(P＜0.05)；③对细胞周期蛋白cyclinD1mRNA表达的影响：与DMSO组相比，复方五味子素B(50～100μg/ml)作用于胃癌细胞株SGC-7901，使其CyclinD1mRNA的表达明显降低(P＜0.05)。
结论：1)复方五味子素B各组成药-五味子乙素、芦荟大黄素、黄芪多糖能明显抑制人胃癌细胞株SGC-7901的增殖；2)复方五味子素B能明显抑制人胃癌细胞株SGC-7901的增殖；3)复方五味子素B抑制胃癌细胞株SGC-7901的增殖可能与其胃癌细胞影响细胞周期以及抑制增殖细胞核抗原PCNA和细胞周期蛋白cyclinD1mRNA的表达有关。