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人NDRG2(N-myc downstream regulated gene 2)基因是本研究组用锚定引物PCR方法从正常人脑cDNA文库中克隆得到的一个新基因,基因库登录号为AF159092,之后在脑胶质瘤和瘤旁组织的消减杂交中,抑癌基因组又克隆到该基因。NDRG2为NDRG基因家族成员之一,且该基因家族成员的氨基酸组成在从低等生物到高等生物的进化中有相当高的保守性,提示该基因家族在细胞的生命过程中起着重要作用。而目前对于NDRG2结构和功能的研究尚处于初步阶段。我们研究小组发现,将该基因转染入某些肿瘤细胞系后具有抑制细胞增殖的功能,且发现该基因在胶质瘤、肺癌和肝癌等十余种肿瘤组织中的表达低于相应的癌旁组织,因此目前观点认为NDRG2可能是抑癌基因,但具体作用机制尚不清楚。本实验首先采用实时定量PCR技术检测胶质瘤中NDRG2的表达,发现NDRG2表达水平明显低于瘤旁组织,进一步采用BSP技术检测胶质瘤组织和细胞系中NDRG2启动子区CpG岛甲基化状态,分析NDRG2启动子甲基化与基因表达的关系。因PI3K通路是胶质瘤中异常活跃的信号转导通路之一,AKT和PKC是其下游分子。有研究表明NDRG2是AKT、PKC的底物,本实验检测了胶质瘤中PI3K、AKT2、PKC-αmRNA表达,在mRNA水平探讨它们与NDRG2表达的相关性。结果发现,脑胶质瘤中NDRG2 mRNA表达低于瘤旁组织,且随胶质瘤恶性程度增高,NDRG2表达逐渐减少;胶质瘤组织NDRG2启动子区甲基化阳性率显著多于瘤旁组织,且甲基化阳性的Ⅳ级胶质瘤多于Ⅲ级、Ⅱ级胶质瘤;病理分级间甲基化阳性位点数目有差异,其中Ⅳ级与Ⅲ级间有显著性差异;检测的32个CpG位点中正向序列的前16个CpG位点发生甲基化的频率显著高于后16个CpG位点;细胞系中,U251发生了甲基化,SHG44未发生甲基化。说明NDRG2的表达降低可能参与了胶质瘤的发生和发展。NDRG2启动子区的甲基化可能是导致NDRG2表达下调进而促使胶质瘤发生恶性演变的原因之一。另外,对胶质瘤中PI3K、AKT2、PKC-αmRNA表达量的检测发现PKC-αmRNA表达高于瘤旁组织,余无明显差异,且上述蛋白激酶在mRNA表达量方面未发现与NDRG2有相关性,还需在蛋白质水平进一步探讨它们之间的关系。