靶向NF-κB/p65的RNA干扰对人胃癌细胞增殖凋亡的实验研究

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目的:观察瞬时转染特异性NF-κB/p65 siRNA后人胃癌细胞SGC-7901中NF-κB/p65,COX-2的表达,探讨RNA干扰NF-κB/p65对人胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:分siRNA组、阴性对照组与空白对照组三组,体外培养人胃癌细胞SGC-7901,分别瞬时转染特异性NF-κB/p65 siRNA,阴性对照siRNA,①转染12、24、48小时后用MTT法检测siRNA组、阴性对照组与空白对照组细胞的增殖活性。②转染24、48小时后流式细胞仪分析三组细胞周期分布与凋亡的变化。③RT-PCR检测三组细胞NF-κB/p65,COX-2的mRNA表达水平。④免疫组化法测上述三组NF-κB/p65,COX-2蛋白表达水平。结果:转染NF-κB/p65特异性siRNA组细胞与两对照组相比,①细胞生长明显减缓,细胞增殖活性明显受到抑制(p<0.05)②细胞生长阻滞于G1期,G0-G1期细胞比例增加,凋亡增多,凋亡率明显上升(p<0.01)③siRNA组较空白对照组mRNA的表达明显下降(p<0.01),而阴性对照组与空白对照组之间差异无显著性(p>0.05)④转染NF-κB/p65 siRNA组NF-κB/p65,COX-2的蛋白表达水平有明显下调。结论:靶向干扰NF-κB/p65基因可有效抑制胃癌细胞的增殖,使癌细胞阻滞于G0-G1期并诱导其凋亡,干扰NF-κB/p65基因可能通过下调COX-2表达起作用。
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