珊瑚共附生海洋细菌SH27菌株生防大豆疫病初步研究

来源 :广东海洋大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:cxy8933
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从珊瑚、海藻、红树等材料中共获得11株对大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)具有较强拮抗效果的细菌菌株,其中以珊瑚共附生细菌SH27菌株的抗菌谱广、拮抗作用强且稳定。本文对SH27菌株种类鉴定、在大豆体内定殖、对大豆促生、对大豆疫病的生防作用及防御酶等进行了研究。获得如下研究结果:1、经形态特征观察、生理生化试验测定及基因序列分析,SH27菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Basillus amyloliquefaciens)。2、利用抗利福平和抗病原菌双重标记法对SH27菌株在大豆苗内的定殖动态测定结果表明:SH27菌株可通过灌根和涂叶处理在大豆体内定殖,定殖时间达31d以上,但涂叶处理的根部均未回收到标记菌株。用吖啶橙荧光染色法和平板分离法对SH27菌株处理后大豆苗体内内生细菌总量和可培养细菌数量测定分析结果表明:SH27菌株处理后大豆内生细菌数量和种类均有明显的增加。灌根处理大豆的根茎叶内生细菌总量平均值分别为7.16×107ind./g、3.98×107ind./g和4.16×107ind./g,根部和茎部分别比空白对照增加70.88%、5.57%,叶部含量变化不大;内生可培养细菌平均含量分别为16.36×105cfu/g、7.18×105cfu/g、6.43×105cfu/g,分别比空白对照增加88.91%、79.95%和97.24%。3、SH27菌株对大豆促生作用测定结果表明,菌株发酵液灌根处理后,大豆叶片的叶绿素含量与光合速率、根系活力与水分吸收能力等均显著高于空白对照处理,与对照相比,发酵液处理一次、二次和三次,其大豆叶片叶绿素含量分别增加41.90%、53.63%和57.82%,光合作用速率分别增加47.63%、67.6%和70.1%,根系活力分别增加87%、106.45%和180.64%,蒸腾作用分别高9.57%、31.1%和23.2%,水分利用率分别增加34.59%、27.57%和37.84%。4、盆栽防病试验结果表明:SH27菌体、培养滤液和菌株发酵原液处理后24h接种病原菌,9d后各处理防治效果分别为30.77%、30.00%、52.86%;SH27菌株发酵液、10倍稀释液、100倍稀释液处理大豆苗,接种病原菌9d后的防病效果分别是52.86%、34.29%、23.33%;SH27菌株发酵液灌根后间隔0、24、48、72h接种病原菌,9d后各组防效分别为23.32%、41.29%、49.94%、52.44%;接种大豆疫霉菌后间隔24h、48h后SH27菌液处理,3d后其防效分别为24.65%、14.5%。由此可见,SH27菌株对大豆疫病具有较好的预防效果,但治疗效果不好。防御酶活测定结果表明:SH27菌株+病原菌处理后大豆苗中的可溶性蛋白与MDA含量以及CAT、POD、SOD等酶活性变化均比病原菌处理的有所降低,且变化趋势较为平稳;但PAL酶活以菌液+病菌处理最高,表明菌液处理可能对大豆PAL酶活性有诱导作用。
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