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目的: 通过总结导师岳仁宋教授诊治糖尿病高危足的临床经验,结合中药糖足颗粒的药效学实验研究,评价该中药复方的药效动力学,以丰富糖尿病高危足的临床诊疗思路,为糖足颗粒大量投入临床使用做好准备。 方法: 1.通过阅读相关文献、定期跟师门诊、医案整理、听师讲座、临床观察等多种途径,在岳师指导下,提炼其糖尿病高危足的诊治经验,从辨病审机到立法制方,全面总结岳师诊治糖尿病高危足的临床经验,反映岳师在糖尿病及其并发症领域的诊疗思路。 2.中药糖足颗粒的药效学实验研究:①血瘀动物模型实验:SD雄性大鼠30只,随机分成5组:糖足颗粒大剂量组、糖足颗粒小剂量组、阳性对照组、模型对照组、空白对照组,每组6只。糖足颗粒大、小剂量组分别给药2.04mg/kg和1.02mg/kg;阳性对照组予温蒸馏水;余各组不给药。每天给药1h,持续1周。在第6天给药后30min,除空白对照组外,其余各组每鼠尾静脉注射高分子右旋糖酐500mg/kg,6h后重复1次。第7d于给药后1h再重复1次。15min后由股动脉放血约4ml,肝素抗凝。检测血液流变学指标分析:全血粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数、红细胞压积、红细胞刚性指数、红细胞变形指数、血浆纤维蛋白原,并进行组间比较。②棉球致肉芽肿动物模型实验:雄性大鼠一批,用3%戊巴比妥钠30mg腹腔注射以麻醉处理,无菌操作下每只大鼠沿下腹中线切开腹壁,将2粒灭菌棉球分别植入两侧腹股沟皮下,缝合皮肤切口。次日,将存活的40只大鼠同前随机分为4组:糖足颗粒大剂量组、糖足颗粒小剂量组、阳性对照组,空白对照组,每组10只。按血瘀动物模型实验剂量给药,每日定时给药1次,连续给药30天。给药步骤完成后,进行股动脉取血,在4℃的条件下离心,3000rpm,10min,使用移液枪收集上清液,运用ELISA法测定血清中TNF-α、IL-1β含量,并进行组间比较。再处死大鼠,仔细剥离出其两侧腹股沟皮下棉球,在70℃烘箱中恒温干燥24h后,称重,将称得的重量减去棉球重量,即得肉芽肿干重,计算肉芽肿形成抑制率,进行组间比较。③小鼠热板法:将若干昆明种雌性小鼠置于预热的不锈钢热板上,选出基础痛阈值在5~30s内的小鼠40只,按前述棉球致肉芽肿动物模型实验分组、给药剂量。给药1周,在最后一次给药后的0.5h、1h、1.5h同前测定各鼠的痛阈值,记录各鼠不同时间的痛阈值,并进行组间比较。④小鼠醋酸扭体法:昆明种小鼠40只,雌雄各半,体重20~25g,按前述棉球致肉芽肿动物模型实验分组、给药剂量,给药一周,末次给药后1h,于每鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2ml/只,观察并记录给醋酸后20分钟内小鼠的扭体次数,并进行组间比较。 结果: 1.岳师认为糖尿病足整个病程中湿、毒、瘀常交相呼应,祸及患肢,尤其是糖毒之害,贯穿始终。故以三期辨证的思路论治,重视治未病理念,在内治基础上,以糖足颗粒外用熏洗,治疗糖尿病高危足取得了较好的疗效。 2.血瘀动物模型实验:糖足颗粒大剂量对造模引起大鼠的全血高、中、低切黏度值异常升高具有显著抑制作用(P<0.01);糖足颗粒大剂量还可通过降低血浆粘度(P<0.05)、纤维蛋白原(P<0.01)、红细胞聚集指数(P<0.05)、红细胞压积(P<0.05)改善血瘀模型模型的血液流变性。糖足颗粒小剂量对造模引起的血瘀证大鼠的血液流变学的红细胞聚集指数、血浆纤维蛋原亦有一定的改善作用(P<0.01),但强度弱于高剂量组。棉球致肉芽肿动物模型实验:植入大鼠两侧腹股沟皮下的灭菌棉球在给药30天后产生明显的肉芽增生现象。与正常空白组比较,糖足颗粒大剂量组和糖足颗粒小剂量组均可抑制棉球肉芽肿形成,表现为肉芽的干重降低(P<0.05),其对肉芽肿的抑制率分别为22.14%,27.86%,明显优于阳性对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。糖足颗粒组的肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β与正常组比较含量减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。糖足颗粒大剂量组的肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1β含量与阳性组比较,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。小鼠热板法:与空白对照组比较,糖足颗粒大剂量组给药后1h可以显著提高热致痛小鼠的痛阈值,差异具有统计学意义(P<0.05)。表明大剂量中药糖足颗粒能提高小鼠对热致痛的痛阈值,延长痛阈时间,其在给药后1h发挥最大效应。糖足颗粒小剂量组、阳性对照组未有明显统计学意义(P>0.05)。小鼠醋酸扭体法:与正常空白组比较,中药糖足颗粒大剂量组能明显减少小鼠的扭体次数(P<0.05),差异具有统计学意义。糖足颗粒小剂量组、阳性对照组未出现明显的统计学差异(P>0.05)。 结论: 1.岳师针对糖尿病高危足的病因病机,结合多年临床经验,引入“未病先防”的思想,在临床上运用中药糖足颗粒浴足治疗糖尿病高危足疗效显著。 2.中药糖足颗粒具有一定的活血化瘀作用。中药糖足颗粒剂可降低血瘀模型大鼠血液中的全血粘度、血浆纤维蛋白原、血浆粘度、红细胞聚集指数、红细胞压积含量。 3.中药糖足颗粒可抑制肉芽肿增生,降低血清中肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β含量达到抗炎作用。 4.中药糖足颗粒大剂量组镇痛效果明显。既能提高小鼠热刺激体表的痛阈且热板痛反应时间也有所延长,也能抑制醋酸刺激腹腔黏膜引起的痛反应,减少各鼠的扭体次数。