酵母核糖核酸制备新技术的研究

来源 :南京化工大学 南京工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gongzi8886
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该文首先对影响酵母RNA释放的因素进行了探讨,抽提时间、盐的浓度、温度、酵母 浓度对RNA抽提有不同程度的影响;通过正交设计及数据分析,得了最佳的抽提条件:酵母 浓度10﹪、盐浓度5﹪、温度100℃,时间2h.在此条件下得到抽提液RNA浓度为8.30g/l、蛋白质为29.34g/l、C<,RNA>/C<,protein>为0.283.从RNA与蛋白质的物料特性出发,提出了 分离纯化RNA的新工艺-即用离子交换色谱法分离纯化RNA.研究RNA的分离新工艺时,提出 选择树脂时应考虑树脂对RNA的吸附容量和分离因数α<,proRNA>,结果发现NK333阴离子交换树脂适合RNA的分离,并考察了NK333树脂与RNA相互交换动力学关系;详细研究了RNA的吸附、洗杂和洗脱工艺.研究表明RNA的最佳分离条件为:在pH为6.96、溶液浓度为5g/l左右 时的RNA溶液以2ml/min的流量泵入离子交换柱中,分别用0.01NNH<,3>H<,2>O溶液和lNNaCl 、pH为12的溶液洗杂和洗脱,此时树脂对RNA的平均贯穿容量达到0.11gRNA/g湿树脂,RNA的收率高达90﹪.
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