本论文由综述和研究报告两部分组成。 第一部分介绍了微流体芯片的制作原理及进展、增强化学发光体系的类型、磁性微粒技术和自动化检测技术;简要地概括和总结了近年来化学发光免疫分析法与微流控芯片结合分析分方法的研究进展;展望了以化学发光为检测手段的微流体分析芯片在环境监测、食品安全检测、疾病检测、新药开发等领域的应用。 我们在微流控芯片制作的实验中发现前烘温度、显影时间是影响最终图形分辨率和高深宽度比的主要工艺条件,并建立了在实验室制作PDMS微流控芯片的新方法。SU-8光敏胶前烘温度控制在65℃烘6小时、95℃烘2小时,曝光时间12-14小时,中烘温度控制在65℃烘5小时、95℃烘2小时,制作的图形具有高的分辨率和深宽比。将PDMS与固化剂以10:1的比例混匀,于65℃烘40分钟可使PDMS进行聚合。该方法用于PDMS微流控芯片的制作并用于皮蛋中铅离子的测定,其结果令人满意。 以PDMS微流控芯片的微通道作为样品通道及检测通道,以蠕动泵作为进样推动力,并基于过氧化苯甲酰在碱性介质中能直接氧化鲁米诺反应产生强烈的化学发光,建立了一个高灵敏度,准确,快速,简便测定过氧化苯甲酰的微流控芯片-化学发光检测新方法。利用该方法测定过氧化苯甲酰,其线性范围为1×10^-7～1×10^-5 g/mL,检出限为:1.0×10^-8 g/mL,对5.0×10^-6 g/mL过氧化苯甲酰8次平行测定的相对标准偏差为2.8%。样品加标回收率为95.7%～104.4%。 将偶联有OVA-CLB的金磁微粒通过外加磁场固定于玻璃微通道内,并使它同样品中的CLB相互竞争和CLB抗体结合,所结合的抗体与HRP标记羊抗兔IgG反应后,利用HRP催化对碘苯酚增强的鲁米诺-过氧化氢体系化学发光,建立了测定尿液中CLB的流动注射增强化学发光免疫分析新方法。在选定的实验条件下,化学发光信号与CLB浓度在1×10^-11 g/ml-1×10^-10 g/ml成良好的线性关系,其相关系数为0.99719。对同一样品连续11次测定的相对标准偏差为3.2%。每次分析测定需15 min。对尿液中CLB进行测定,结果比较满意。本文建立了将外加磁场、玻璃微通道与金磁微粒固相载体相结合测定CLB的流动注射增强化学发光免疫分析新方法,以微通道作为免疫反应器和金磁微粒作为载体具有分析速度快,响应时间短,固相免疫分离自动化的优点。在玻璃微通道内进行物质分离和免疫学反应所消耗的试剂较少,因此分析速度和响应速度快;以金磁微粒作为固相载体,具有清洗和分