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本实验室前期构建了糙皮侧耳（Pleurotus ostreatus）菌丝体和子实体原基的LongSAGE文库，共得到6930个tag，其中有926个tag是子实体原基阶段特异表达的。在这926个子实体原基阶段特异表达的tag中大约有94.38％的tag不能同GenBank中报道的EST匹配。本课题利用GLGI技术，以经过Nla III限制性内切酶酶切后的糙皮侧耳子实体原基双链 cDNA为模板，以不能同GenBank中报道的EST匹配的tag（表达量菌丝体为0，子实体原基不为0）序列为上游引物，以加了接头的 AUAP（5′GGCCACGCGTCGACTAGTAC3′）为下游引物进行PCR扩增，得到不能同GenBank中报道的EST匹配的tag所对应基因的3′端cDNA序列。根据已经获得的3′端cDNA序列设计特异引物。参照SMARTerTM RACE cDNA Amplification Kit，以试剂盒提供的特异引物UPM（5′CTAATACGACTCACTATAGGGCAAGCAGTGGTATCAACGCAGAGT3′）为上游引物，根据已经获得的3′端cDNA序列设计的特异引物为下游引物，利用5′RACE技术得到不能同GenBank中报道的EST匹配的tag所对应基因的5′端cDNA序列，拼接3′端cDNA序列和5′端cDNA序列得到不能同GenBank中报道的EST匹配的tag所对应基因的全长cDNA序列。 以糙皮侧耳GAPDH基因为内参，对糙皮侧耳lectin基因和aspartic peptidase基因在糙皮侧耳菌丝体和子实体原基中的表达量进行实时荧光定量PCR检测，结果显示二者的溶解曲线均为单一峰，表明没有非特异性扩增。二者的2-△△Ct值与LongSAGE文库中对应基因在菌丝体和子实体原基阶段表达量结果相符。 以植物转化用Ti质粒pCAMBIA1300为质粒骨架，以糙皮侧耳甘油醛三磷酸脱氢酶基因启动子（GPD promoter）为驱动元件，以绿色荧光蛋白（eGFP）和潮霉素B磷酸转移酶（hph）为双报告基因，以lectin为目的基因，构建了RNAi干涉载体，以期对糙皮侧耳lectin基因进行功能研究。