绢丝昆虫野桑蚕与柳蚕卵黄原蛋白的研究

来源 :安徽农业大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:jim2y
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本论文包括两部分主要内容。第一部分是野桑蚕卵黄原蛋白的鉴定与cDNA序列的分析,以及卵黄组成的研究。利用SDS-PAGE和Western blotting的方法分析鉴定了野桑蚕卵黄原蛋白是由大小两个亚基组成,根据分子量marker得出分子量分别为175 kD和42 kD。对不同性别和不同时期野桑蚕血液的SDS-PAGE分析说明了,野桑蚕卵黄原蛋白存在性别、时期的特异性。通过对野桑蚕吐丝期开始至第5日的雌体脂肪体总RNA的含量进行了比较得出,从吐丝期开始到第5日逐渐递增,与野桑蚕的血液中卵黄原蛋白的含量的变化是一致的。利用昆虫卵黄原蛋白进化上的保守性,根据家蚕的Vg cDNA序列设计4对特异性引物在野桑蚕的总RNA进行RT-PCR扩增,分别得到了4条1000bp左右的cDNA片段:对于3’-end和5’-end进行RACE扩增,分别得到了2条1000bp左右的cDNA片段,根据cDNA片段的重复性,从而解析出野桑蚕卵黄原蛋白cDNA全序列。该序列含有5754碱基,由一个ORF组成,编码1780个氨基酸,卵黄原蛋白的氨基酸序列和cDNA序列与家蚕的同源性分别为97.6%和98.1%。含有特定的酶切识别结构RSRR,卵黄原蛋白前体被酶切为大小两个亚基,根据氨基酸推算的相对分子质量分别为161.571 kD和40.794 kD,如果考虑到翻译后的修饰,这与SDS-PAGE的结果是吻合的。该序列含有一个多聚丝氨酸区,出现在切割位点后的17氨基酸处,DGQR和GICG分别出现在第1581和1597氨基酸处,C末端含有6个保守的半胱氨酸。根据已经解析的18种昆虫卵黄原蛋白的氨基酸序列构建了系统树,结果证明了昆虫卵黄原蛋白的一级结构在进化上具有很好的保守性,尤其是5种绢丝昆虫卵黄原蛋白,它们的氨基酸序列同源性与RAPD分析的结果是一致的。通过家蚕与野桑蚕卵的内容物的SDS-PAGE,分析了野桑蚕卵黄蛋白主要有卵黄磷蛋白(Vtn),卵雌异性蛋白(ESP)和30K蛋白组成。通过Native-PAGE分析推定了野桑蚕卵黄原蛋白在天然状态下的分子量约为440kD。 第二部分是柳蚕生物学特性以及卵黄原蛋白的鉴定。柳蚕(Actias seleneHübner)是吐丝结茧的经济昆虫之一,属鳞翅目,大蚕蛾科,国内外对其相关的研究较少,作为一种野生绢丝昆虫,对其研究具有很重要的意义。本文通过室内饲养的方法,观察了柳蚕的生物学特性,在合肥地区幼虫四眠五龄,二化胜,蛹滞育,全龄期达40d以上。通过扫描电子显微镜观察了柳蚕卵孔的显微特征,对其形态进行了描述,并与其它野蚕进行了比较。通过SDS一PAGE和Westemblotting鉴定了柳蚕的卵黄原蛋白是由大小两个亚基组成,分子量分别为1 75 kD和45 kD,存在组织、时期、性别表达的差异性。
其他文献
700旋回破碎机是一些大中型矿山的粗碎工序的关键设备。其主轴属于非正常消耗的事故备件。某矿选矿车间在三天内出了两次主轴折断的重大事故,造成备件供不应求的局面。我们
金厂峪金矿氰化厂采用氰化钠浸出金,贫液经诤化后仍然含全氰15~30(毫克/升),达不到国家规定的排放标准。1979年9月改进了净化工艺,获得满意的结果,总氰降到0.5(毫克/升)以下
指出,要关注学生的个体差异,使每个学生都有成功的学习体验,得到相应的发展,这对学困生来说,任务更为艰巨.特别是2009年国家强制性减负政策的实施,转化后进生工作必将由课后
  本论文研究了柞蚕丝碱性溶液法与酶法脱胶的工艺,并应用冰冻法、透析法和等电点沉淀法研究了柞蚕和家蚕丝胶的提取方法,以期研究出一种简易、廉价的脱胶和提取蚕丝丝胶蛋白
云和县利用菌种栽培茯苓已有二十年历史,产量逐年上升。据不完全统计,1993年丽水地区茯苓干产量达15000吨左右。但近年来有许多药农反映茯苓菌核松泡,含砂茯苓较多,质地欠白
《新闻与写作》编辑部主办了“新闻采写一得,征文竞赛活动,这是一件很有意义的事。可惜,鉴于主客观的原因,我错过了一次参加竞赛练笔、争取“榜上有名”的机会。前些日,在与
长期以来,传统的教学观念禁锢着人们的思想,影响和支配着教师的教学行为.在平时的小学数学课堂教学中,我们发现教师的不少教学行为偏离了教学规律或教学规范,使教学的功能不
一选育经过优质糯稻新品种浙糯2号是浙江省农科院原子能利用研究所用~(60)Co-γ射线处理突变品系R8617干种子选育而成,于1986年辐照处理,并种成M_1代。1987年在桐庐县稻瘟病
一、激发学生的写字兴趣爱因斯坦曾说过:“兴趣是最好的老师”。只有从学习过程中产生兴趣,才能自觉地、热心地、专心致志地学习。培养学生的写字兴趣,首先要让学生明确写好
用于破碎兼烘干粘士含量较高的潮湿水泥原料的反击式破碎机(图1)。原料在其破碎腔内充分地搅和,以便有效地破碎兼烘干。块度为750~800毫米的物料由给料机通过喂料栅板送到转