LC-MS/MS检测鸡可食性组织中黏菌素残留量的方法研究

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黏菌素(coslitin)也称为多黏菌素E(polymyxin E)、抗敌素,它是一种含有至少30多种成分的白色结晶或结晶性粉末状混和物,是主要由黏菌素A(多黏菌素E1,C53H100N16O13)和黏菌素B(多黏菌素E2,C52H98N16O13)组成,此类药物口服不吸收但注射给药吸收迅速。本研究目的是建立液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测鸡可食性组织(肌肉、肾脏、肝脏、皮脂)中黏菌素残留量的方法,为动物源性食品中黏菌素的残留提供检测技术。选用超高效液相色谱-串联质谱仪5500,采用电喷雾离子源正离子检测模式,多反应检测模式,在700℃的离子源温度,5500 V的喷雾电压,55 arbitrary units的鞘气(N2)流速,20 psi的气帘气压力,60 psi的雾化气压力,50 psi的辅助气压力,100 ms滞留时间的质谱条件下,将鸡的可食性组织经过10%的三氯乙酸和50%的乙腈水提取,继而过HLB小柱,最后上机检测。实验结果表示,样品浓度范围在10μg/kg400μg/kg范围内黏菌素A和黏菌素B的峰面积与样品的质量浓度呈现的线性关系差。黏菌素A和黏菌素B在鸡的肌肉、皮脂、肝脏和肾脏中的检测限(LOD)均为5μg/kg,定量限(LOQ)均为10μg/kg。在鸡的肌肉、皮脂、肝脏及肾脏中分别添加LOQ、0.5MRL、MRL、2MRL四个浓度进行添加回收试验。鸡肌肉组织中黏菌素A在10、75、150、300μg/kg添加浓度的批内平均回收率为70.45%94.57%,批内变异系数3.16%7.59%,批间变异系数4.96%7.28%,黏菌素B在10、75、150、300μg/kg添加浓度的批内平均回收率为73.49%89.81%,批内变异系数3.92%8.79%,批间变异系数6.43%9.28%;鸡脂肪组织中黏菌素A在10、75、150、300μg/kg添加浓度的批内平均回收率为70.45%97.09%,批内变异系数2.56%9.32%,批间变异系数5.44%9.41%,黏菌素B在10、75、150、300μg/kg添加浓度的批内平均回收率为76.98%91.36%,批内变异系数4.20%8.42%,批间变异系数3.76%8.31%;鸡肝脏组织中黏菌素A在10、75、150、300μg/kg添加浓度的批内平均回收率为83.92%94.21%,批内变异系数1.60%8.30%,批间变异系数3.16%5.62%,黏菌素B在10、75、150、300μg/kg添加浓度的批内平均回收率为81.63%91.39%,批内变异系数4.58%8.43%,批间变异系数3.52%8.45%。鸡肾脏组织中黏菌素A在10、100、200、400μg/kg添加浓度的批内平均回收率为77.53%94.68%,批内变异系数3.20%8.68%,批间变异系数3.69%8.37%,黏菌素A在10、100、200、400μg/kg添加浓度的批内平均回收率为79.34%90.47%,批内变异系数3.40%8.40%,批间变异系数2.86%5.84%。实验结果表明,本研究建立的LC-MS/MS检测鸡可食性组织中黏菌素残留量的方法操作简单、灵敏度高、重复性良好,符合兽药残留分析的要求。
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