目的:构建了一种穿膜肽介导的输送抗癌药物的纳米粒给药系统,探索其抑制肿瘤生长及降低肿瘤侵袭迁移的作用。制备由低分子量鱼精蛋白(LMWP)修饰,装载抗肿瘤药物阿霉素及中药单体穿心莲内酯形成药物双包载的脂质体。该输送系统为研究治疗乳腺癌转移提供了一种新思路。方法:1、利用化学合成方法,将穿膜肽低分子量鱼精蛋白(LMWP)修饰到脂质体表面,制备脂质体包载穿心莲内酯与阿霉素。脂质体的粒径和电位通过粒径仪进行表征,并分析其体外稳定性;通过透射电子显微镜(TEM)观察脂质体的形态和分布;使用荧光分光光度计和高效液相色谱仪测定脂质体药物包载量;采用透析法考察脂质体药物体外释放行为;通过荧光显微镜、流式细胞分析仪考察脂质体入胞能力;通过激光共聚焦显微镜分析入核能力;采用MTT法考察对肿瘤细胞的增殖抑制效果;使用划痕实验、细胞侵袭实验观察脂质体对肿瘤细胞侵袭和迁移的抑制作用;通过流式凋亡实验研究药物促肿瘤细胞凋亡的协同效应;运用Western blot法研究药物抑制肿瘤转移的机制。2、本研究使用小鼠乳腺癌细胞株4T1移植瘤小鼠肿瘤模型为研究对象,研究脂质体联合给药体系的体内药效及生物安全性,并考察该联合用药体系抑制肿瘤生长及转移的作用。成果:本研究成功制备了表面修饰有穿膜肽低分子量鱼精蛋白(LMWP)的脂质体,粒径为180 nm左右,Zeta电位为1.1m V左右。电镜下显示纳米粒呈球状,均匀分布。该方法有效实现穿心莲内酯与阿霉素的双包载,其中穿心莲内酯的包封率为79%左右,阿霉素的包封率为74%左右。脂质体粒径在181nm左右;脂质体分散性好,48小时内粒径较为稳定;细胞摄取实验提示,LMWP能够提高药物在肿瘤部位的蓄积;MTT实验及流式凋亡实验表明穿心莲内酯联合阿霉素能够有效地抑制肿瘤细胞的迁移,促进肿瘤细胞坏死凋亡;划痕实验、细胞侵袭实验证实该联合用药体系能显著抑制肿瘤细胞的侵袭迁移;Western blot结果提示,两药联用抑制肿瘤转移的协同机制与下调VEGF的表达水平有关;体内研究结果表明,穿心莲内酯联合阿霉素具有协同抑制肿瘤生长及抗肿瘤转移的作用。结论:本研究通过体内外实验结果表明,构建修饰有LMWP的脂质体共包载穿心莲内酯与阿霉素的给药体系,表现出较好的抑制肿瘤生长和转移的效果,为克服乳腺癌的转移提供了一个新思路。