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目的：探讨妊娠期高血压疾病(HDP)患者临床诊断前血浆中681种细胞因子的表达及其差异蛋白在生物学过程和信号通路中的变化规律；筛选早期预测血浆蛋白标志物，探讨其与HDP发病的关系，评估其对HDP发生的预测价值。研究标志物MSP对绒毛外滋养细胞株TEV-1侵袭功能的影响，初步探讨MSP-RON系统与HDP胎盘浅着床的关系。 方法：采用巢式病例对照研究，收集2011年4月至2013年7月在本院产检和分娩的孕妇15900例。外周血血浆采自妊娠8~20周，病例追踪至分娩后。第一部分，候选蛋白筛选：2组独立样本(1:1匹配)共88例，其中24对用于507蛋白抗体芯片检测，20对用于174蛋白抗体芯片检测。采用AAH-BLG和AAH-CYT-G软件分析比较两组681个血浆蛋白的表达差异，应用DAVID、go oncology、KEGG PATHWAY、string等生物信息学软件对差异蛋白进行功能注释和富集分析，初步筛选HDP相关的节点蛋白。第二部分，候选蛋白验证：将确诊为HDP的53例孕妇和以年龄孕周1:2相匹配的106例正常孕妇的血浆标本，应用ELISA法验证血浆TRAIL、sEng、TIMP4、BLC、BMP5、MSP水平，结合临床高危因素调查数据，通过多因素Logistic回归分析、ROC曲线确定候选蛋白与HDP发生的关联性和临床预测效率，建立联合预测模型。第三部分，MSP-RON系统对滋养细胞侵袭能力的影响：采用体外侵袭实验，用不同剂量的anti-MSP作用于TEV-1早孕滋养细胞，观察细胞穿越matrigel胶的能力。计数跨胶细胞数，观察TEV-1细胞迁移能力。 结果： 1.候选蛋白筛选：从681个血浆蛋白中筛选出HDP诊断前表达差异蛋白35个，其中TRAIL/TNFSF10、GITR/ TNFRF18、IGFBP-2、beta-NGF、GFR alpha-4、Dkk-1、CXCR3、Activin A、Eotaxin/ CCL11、MMP-1、VCAM-1(CD106)、Fas/ TNFRSF6、BMP-7、BMP-5、IL-2 R gamma、IL-18 BP alpha、IL-13 Ralpha2、IL-6等18个蛋白在HDP患者血浆中表达下调；而TIMP-4、Endoglin、IL-17RD、IL-17RC、LBP、Insulin、PF4/CXCL4、WISP-1/ CCN4、SPARC、Thrombospondin-2、Angiostatin、BMP-6、MSP、TRAIL R3、sTNF-RI、Osteoprotegerin、BLC等17个蛋白在HDP患者血浆中表达上调。 2.差异蛋白功能注释和富集分析：差异蛋白主要涉及血管形成、细胞表面受体连接信号转导、免疫反应、细胞凋亡调控、细胞分化正性调节、炎症反应和趋化作用等生物学过程。主要通路有：细胞因子间相互作用、凋亡和转化生长因子β信号通路。通过蛋白相互作用网络分析确定MSP、TRAIL、TIMP4、sEng、BLC、BMP5、CXCR3、IL6、Insulin、VCAM-1、beta-NGF、Osteoprotegerin/TNFRSF11B等蛋白为参与HDP发病的关键蛋白。 3.候选蛋白验证：根据差异蛋白富集分析结果，对可获得检测试剂盒的差异蛋白进行验证。HDP患者与正常孕妇孕8-20周血浆TRAIL、TIMP4、sEng、MSP、BLC等因子水平的表达具有显著差异，经ROC曲线分析示：TRAIL、TIMP4、sEng、MSP、BLC预测HDP发生的曲线下面积分别为0.59、0.66、0.75、0.69和0.59；其中sEng的AUC最高，与TRAIL、BLC的AUC比较差异有统计学意义，P值分别为0.021、0.014。余各组间比较差异均无统计学意义。利用多指标建立联合预测模型，标志物TRAIL、sEng、MSP联合危险因素孕次、孕前BMI预测HDP的曲线下面积为0.90(95％ CI：0.84~0.94)；以0.290为临界值时，预测HDP发生的敏感度、特异度、阳性似然比和阴性似然比分别为87.8%、78.6%、4.11和0.16，预测准确率为82.9%。联合模型对HDP具有高等预测价值，远高于单个指标的预测价值。 4.MSP-RON系统对滋养细胞侵袭能力的影响：加入 anti-MSP100ng/ml、200ng/ml、500ng/ml的各组滋养细胞穿透Matrigel基质胶的数目分别为70.8±32.5、66.2±21.5、33±10.8，与对照组(100.5±0.9)相比明显减少，P值分别为0.045、0.030、0.005。 结论： 1.孕8-20周HDP组孕妇血浆中35个蛋白可能与疾病的发生有关，证明 HDP是一组具有不同生物学改变的复杂疾病。 2.差异蛋白主要涉及血管形成、细胞表面受体连接信号转导、免疫反应、细胞凋亡调控、细胞分化正性调节、炎症反应和趋化作用等生物学过程；主要涉及细胞因子间相互作用、凋亡和转化生长因子β信号等通路。其中MSP、TRAIL、TIMP4、sEng、 BLC、 BMP5、 CXCR3、 IL6、 Insulin、 VCAM-1、 beta-NGF、Osteoprotegerin/TNFRSF11B等蛋白是与HDP发生相关的关键蛋白。 3.TRAIL、sEng、TIMP4、BLC、MSP与HDP发生具有关联性，孕8-20周联合TRAIL、sEng、MSP、孕次和孕前BMI对HDP具有高等预测价值。 4.anti-MSP影响早孕滋养细胞的侵袭行为，anti-MSP可能通过阻滞 MSP-RON信号系统抑制滋养细胞的侵袭致胎盘螺旋动脉重塑不良。间接证明血浆标志物MSP与HDP胎盘形成不良有关。