一、双青草环糊精包合物对急性肺损伤的抑制作用研究　　 双青草(SQC)是一种中药复方，由金银花、大青叶和鱼腥草三味中药组成，由于双青草的有些活性成分具有挥发性、不稳定性和难溶性，我们制备了双青草环糊精包裹物(SQC-β-CD)，在实验动物模型上研究SQC-β-CD治疗LPS气管注射诱导的急性肺损伤的效果，并探讨其作用机理。　　 小鼠气管注射50μl LPS(10μg/只)诱导急性肺损伤，腹腔注射SQC-β-CD(10或20mg/kg)或地塞米松(2mg/kg)给予治疗，采用两种给药方式：A，LPS注射后半小时和注射后三小时分别腹腔注射溶剂(5％吐温溶液)，SQC-β-CD溶液或地塞米松注射液。B，LPS注射前3小时和注射后半小时分别腹腔注射溶剂，SQC-β-CD溶液或地塞米松注射液，地塞米松(2mg/kg)为本实验的阳性对照药。气管注射LPS24小时后，小鼠肺组织水肿明显，肺泡间隔明显增厚，有大量的炎症细胞浸润，明显的肺出血，根据给药方式A和B给予SQC-β-CD20 mg/kg治疗，观察到肺组织损伤明显改善，小鼠肺泡有少量水肿，炎症细胞浸润较少，未见明显肺出血和肺间隔增厚，效果与相同方式给予地塞米松效果相当。气管注射LPS6小时后引起肺组织MPO显著增加，表示PMNs在肺组织内的募集，根据给药方式A和B腹腔注射SQC-β-CD(20mg/kg)可以明显降低LPS引起的MPO活性增加，效果优于DEX(2mg/kg)。气管注射LPS12小时和24小时后，检测BALF中白细胞，与阴性对照组相比，LPS处理的小鼠白细胞数目增加非常显著，且绝大多数为PMNs，A、B两种方式腹腔注射SQC-β-CD(20mg/kg)均可以明显降低白细胞总数和PMNs的数目，其中方式A的效果优于方式B。气管注射LPS24小时后检测BALF中NO的含量，与阴性对照组相比NO含量显著增加，根据方式A和B腹腔注射SQC-β-CD(20mg/kg)或DEX(2mg/kg)，NO水平均明显下降，而且SQC-β-CD(20mg/kg)的效果与DEX(2mg/kg)相当。注射LPS后24小时小鼠肺组织免疫组化检测iNOS活性，正常小鼠肺组织基本检测不到iNOS，而LPS诱导的急性肺损伤小鼠肺部巨噬细胞还有一些炎症细胞iNOS高度表达，SQC-β-CD(20mg/kg)和DEX(2mg/kg)治疗组小鼠iNOS阳性表达面积则明显减少。半定量分析结果表明SQC-β-CD可以明显抑制LPS引起的iNOS表达。　　 二、谷胱甘肽S-转移酶P1抗炎作用的研究　　 谷胱甘肽-S-转移酶(GST)属Ⅱ相代谢酶，是催化谷胱甘肽(GSH)与亲电子的外源物结合的二聚体酶，并可灭活外源物，促使它们排出体外，它们在人群中呈多态性分布。谷胱甘肽-S-转移酶是一组同工酶超家族，GSTP1(GSTπ)是人体内GST的一种重要的活性亚型，在维持细胞的正常机能中发挥着重要作用。　　 内毒素(endotoxin)是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的结构成分之一，其化学本质为脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)。LPS主要由O-特异性侧链、核心多糖、脂质A(lipid A)3部分组成，其中lipid A为其毒性中心。在创伤、感染引起的全身炎症反应综合症(SIRS)及脓毒症中，内毒素是引起致死性休克重要的致病因子。有研究表明，SIRS及脓毒症中，自由基释放增加，自由基反应病理性加剧，自由基损伤在SIRS及脓毒症中具有十分重要的作用，主要表现为细胞和组织毒性作用。　　 我们前期的研究显示，GSTP1在细胞水平具有明显的抗炎作用。本文在体外诱导表达并纯化了GSTP1蛋白，在整体水平上研究GSTP1对炎症反应的抑制作用及机理。小鼠腹腔注射37.5mg/kg LPS导致小鼠75％的死亡率，给予注射LPS后半小时给予GSTP1(WT)(2mg/kg body weight，i.p.)治疗，死亡率降至25％，腹腔注射同样剂量的GSTP1(4M)，GSTP1(Y7F)和BSA死亡率分别为50％，54％和59％。LPS刺激会引起小鼠血浆TNF-α、IL-1β水平显著升高，1.5小时后TNF-α达到高峰，GSTP1可以明显降低此刻TNF-α的含量，6小时后IL-1β水平达到高峰，GSTP1也可以明显降低LPS注射6小时后IL-1β的含量。LPS刺激3小时后BALF中MCP-1显著增加，GSTP1(WT)和GSTP1(4M)均可以显著抑制MCP-1的上调，GSTP1(WT)效果更好。腹腔注射0.5ml3％的巯基乙酸钠引起小鼠腹腔白细胞渗入，10分钟后尾静脉注射GSTP1(2mg/kg)，GSTP1(WT)可以明显抑制腹腔中性粒细胞流入，GSTP1(4M)效果略差与GSTP1(WT)，GSTP1可以减轻巯基乙酸钠诱导的小鼠急性腹膜炎。