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目的:探讨人工合成的针对VEGF-A的siRNA对角膜新生血管的抑制的效果和机制。
方法:C57 BL/6小鼠随机分为4组,麻醉后右眼碱烧伤诱导角膜新生血管。A组使用VEGF-A siRNA结膜下注射干预,B组使用Stable negative control siRNA结膜下注射干预,C组使用生理盐水结膜下注射干预。所有右眼接受注射,左眼做正常对照。D组不使用任何药物做对照。各组观察并比较角膜新生血管的面积、数量、通透性和角膜组织结构的变化。其中角膜新生血管的标记和记数使用CD31抗体DAB免疫组化染色的方法,观察角膜新生血管的通透性使用荧光血管造影的方法。并使用 Elisa法测定并比较各组角膜蛋白抽提液VEGF的含量。
结果:在碱烧伤第10天,各组角膜新生血管的生长达到高峰;A组角膜新生血管的面积明显少于其他各组(P=0.004),数量明显少于其他各组(P=0.000);使用荧光造影观察A组角膜新生血管的渗漏也明显少于其他各组。在碱烧伤第3,7天A组角膜组织VEGF的含量明显少于其他各组(P=0.009)。针对VEGF-A的siRNA对角膜VEGF蛋白的分泌和角膜新生血管的生长有明显抑制作用,对角膜新生血管的通透性、角膜组织结构也有较大改善。
结论:研究证实人工合成的针对VEGF-A的siRNA结膜下给药是有效的,对角膜新生血管有显著抑制作用。为临床治疗角膜新生血管提供了新的思路和方法。